一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠颈静脉内皮细胞（Mouse Jugular Vein Endothelial Cells）
- 细胞别称：MJEC；颈静脉内皮细胞；静脉内皮细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：颈静脉血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型单层铺路石样，接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含2% FBS+内皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基轻柔混匀离心后接种。
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置于培养箱内2小时平衡温度与气体环境。
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%（通常每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度5×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞边缘收缩后立即终止反应。
- 注意事项：
- 避免过度消化导致细胞膜损伤或功能异常。
- 传代后24小时内更换培养基，清除残留消化酶及细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液。
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→转入液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时内台盼蓝染色检测存活率（标准≥95%）。
- 功能验证：血管生成实验或乙酰化低密度脂蛋白摄取检测（P5代细胞应维持典型内皮功能）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中温度失控导致细胞死亡（需提供干冰包装状态证明）。
- 收货3日内经PCR检测证实支原体或细菌污染。
- 复苏后细胞活力低于90%（台盼蓝染色法）。
- 细胞种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形：
- 客户未在72小时内完成细胞复苏操作。
- 使用非推荐培养基或添加剂导致细胞状态异常。
- 因反复冻融或操作不当引起的细胞损伤。
- 未按规范进行污染检测直接开展实验。
