一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠颈动脉成纤维细胞(Mouse Carotid Artery Fibroblasts)
细胞别称:MCAF;颈动脉成纤维细胞;血管成纤维细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
组织来源:颈动脉段血管组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质黏附)
细胞形态:典型长梭形或纺锤形,融合后呈平行束状排列
细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖细胞密度与培养条件)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置于培养箱中平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止消化
注意事项:
- 避免消化时间过长(防止细胞膜完整性受损)
- 传代后12 - 16小时更换新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后轻柔重悬细胞于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:细胞增殖实验(P5代细胞应维持活跃增殖能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录证明)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法)
4. STR鉴定与描述不符
不予重发情形:
1. 客户延迟复苏超过48小时
2. 使用非配套培养基导致细胞功能异常
3. 操作不当导致反复冻融损伤
4. 未按标准流程进行污染检测
(注:以上操作需严格遵守生物安全规范,实验废弃物需经灭菌处理)