一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠主动脉弓内皮细胞(Mouse Aortic Arch Endothelial Cells)
- 细胞别称:MAoEC;主动脉内皮细胞;血管内皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
- 组织来源:主动脉弓段血管内膜
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被基质)
- 细胞形态:单层铺展呈鹅卵石状,接触抑制后呈规则多边形
- 细胞代数:P3 - P8(确保内皮标志物表达稳定及屏障功能完整)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Endothelial Cell Growth Medium(含5% FBS +血管内皮生长因子及肝素)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:~36 - 60小时(与细胞密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床、药物开发或活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于培养箱2小时适应环境
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化30 - 60秒,轻柔拍打促进脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项:
- 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
- 传代后12小时内更换培养基以清除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO、20% FBS及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 转移至液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:CD31免疫荧光染色(P5代细胞阳性率≥98%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度记录异常(需提供物流温度监控截图)
- 到货48小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色影像记录)
- 血管性血友病因子(vWF)免疫检测不达标
- 不予重发情形:
- 未按推荐条件进行原代培养或传代操作
- 使用非指定培养基导致细胞功能异常
- 反复冻融或长期超低温保存后复苏失败
- 未进行污染筛查直接用于共培养实验
(注:所有数据基于标准操作流程验证,实际应用需根据实验体系优化参数。)