一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠心肌干细胞(Mouse Cardiac Stem Cells)
- 细胞别称:MCSC;心肌祖细胞;心脏干细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无心脏疾病史)
- 组织来源:心脏组织(心室/心房分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖特异性细胞基质)
- 细胞形态:不规则梭形或多角形,可形成克隆样集落
- 细胞代数:P3 - P8(确保干细胞特性及分化潜能)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Cardiac Stem Cell Medium(含5% FBS+心肌细胞生长因子及添加物)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度及生长因子补充)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱1小时平衡温湿度
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
- 37℃消化30秒 - 1分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免频繁传代(影响干性维持)
- 传代后48小时内避免换液以保留自分泌因子
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 20min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:干细胞标志物(c - kit+/GATA4+)及分化潜能检测
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 5天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
- 标志物表达与宣传不符(需提供流式检测结果)
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非推荐培养基导致干性丢失
- 未按规范进行分化诱导实验
- 自行改造细胞后功能异常