小鼠腹腔主动脉内皮细胞

小鼠原代细胞

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XM-X04035×10^5小鼠原代细胞4050


一、细胞基本属性

- 细胞名称:小鼠腹腔主动脉内皮细胞(Mouse Abdominal Aortic Endothelial Cells)

- 细胞别称:MAEC;腹腔主动脉内皮细胞;主动脉内皮细胞

- 种属来源:小鼠(Mus musculus)

- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体经筛选无心血管疾病史)

- 组织来源:腹腔主动脉组织段

- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被的培养基底)

- 细胞形态:单层铺展呈多角形或梭形,接触抑制后形成典型内皮细胞镶嵌结构

- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)

- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:小鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS+内皮生长因子及肝素添加剂)

- 培养条件:气相环境为5% CO₂ + 95%空气,恒温37℃,湿度95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),长期保存于 - 150℃以下超低温环境

- 倍增时间:约36 - 60小时(与培养密度及基质包被相关)

- 供应限制:仅用于科学研究,禁止临床应用或动物活体实验


二、细胞培养操作指南

- 收货处理:

  - 冻存管接收后需37℃水浴快速解冻,离心去冻存液,加入预温培养基重悬后接种。

  - 贴壁培养瓶需75%酒精表面消毒,静置于培养箱1小时平衡温度与气体环境。

- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%时传代(建议每2 - 3天操作一次)。

- 传代比例:1:2至1:3分瓶(推荐初始接种密度为4×10³ cells/cm²)。

- 消化方法:

  - 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA),37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察细胞边缘收缩后立即终止。

- 注意事项:

  - 消化过程需轻柔吹打,避免机械损伤影响细胞间连接蛋白完整性。

  - 传代后12小时内更换新鲜培养基,以清除残留消化酶及细胞碎片。


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)。

- 细胞密度:冻存浓度为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。

- 冻存步骤:

  - 离心收集对数生长期细胞,重悬于预冷冻存液,分装至冻存管。

  - 程序降温:4℃平衡30分钟, - 80℃冷冻过夜后转移至液氮长期保存。

- 复苏验证:

  - 复苏后24小时内台盼蓝染色法检测细胞存活率(承诺≥90%)。

  - 功能性验证:Ⅷ因子免疫荧光染色(P5代细胞需维持≥95%阳性率)。


四、售后服务承诺

- 重发标准:

  - 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。

  - 到货72小时内经qPCR证实支原体污染或细菌/真菌污染。

  - 复苏后细胞存活率低于承诺值(需提供台盼蓝染色图片)。

  - 细胞STR鉴定与备案信息不符。

- 不予重发情形:

  - 客户未按规范储存(如冻存管未及时转入液氮或 - 80℃超低温环境)。

  - 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子导致细胞异常。

  - 反复冻融或传代次数超过推荐代数引发的功能退化。

  - 实验操作污染未及时反馈(如培养48小时后未进行首次支原体检测)