一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠颈动脉平滑肌细胞(Mouse Carotid Artery Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:MCASMC;颈动脉平滑肌细胞;血管平滑肌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
- 组织来源:颈动脉中膜层分离
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质贴附)
- 细胞形态:长梭形或融合后呈束状排列,接触抑制后形成典型“峰谷”结构
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含10% FBS+平滑肌细胞特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项:
- 避免剧烈吹打(防止肌丝结构损伤)
- 传代后12小时首次换液以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时存活率≥95%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持平滑肌表型)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度监控截图)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供PCR/培养检测结果)
- 细胞复苏活力低于90%(需提供台盼蓝染色图像)
- 细胞标志物鉴定与描述不符(需提供第三方检测报告)
- 不予重发情形:
- 收货后超48小时未进行复苏操作
- 使用非指定培养基或自行修改培养条件
- 未按规范进行细胞传代导致表型丢失
- 未定期检测支原体直接用于共培养实验