一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠颈动脉内皮细胞（Mouse Carotid Artery Endothelial Cells）
- 细胞别称：MCAEC；颈动脉内皮细胞；动脉内皮细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：颈动脉血管段（经胶原酶灌注消化分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖明胶或纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺展后呈典型梭形或多边形，接触抑制后排列紧密
- 细胞代数：P3 - P8（经功能验证确保内皮特性稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：小鼠内皮细胞专用培养基（含5% FBS+内皮生长因子及肝素）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（视培养密度及基质条件波动）
- 供应限制：仅限科研使用，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，转移至含5mL预热培养基的离心管，轻柔混匀离心去冻存液
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:2至1:4（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含0.1%胶原酶辅助消化）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察到细胞间隙增大后立即终止
- 注意事项：
- 避免机械吹打过度导致细胞膜损伤
- 传代后12小时内避免频繁观察以维持贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20%胎牛血清+细胞保护剂）
- 细胞密度：推荐冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：CD31免疫荧光染色及低密度脂蛋白摄取实验
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
- 细胞复苏存活率低于85%（经第三方检测确认）
- 血管内皮标志物（vWF/CD34）表达未达标准
- 不予重发情形：
- 未按操作指南进行预包被导致贴壁失败
- 使用非指定培养基或血清引起功能异常
- 自行改良冻存液导致复苏后细胞活性丧失
- 未在传代后48小时内反馈问题
