一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠冠状动脉内皮细胞
- 细胞别称：小鼠冠脉内皮细胞；冠状动脉EC
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（雌雄不限，供体筛选无心血管疾病史）
- 组织来源：冠状动脉段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
- 细胞形态：单层铺路石状，接触抑制后呈规则多角形
- 细胞代数：P3 - P8（维持血管内皮标志物表达稳定性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（无血清冻存体系）
- 培养基：小鼠内皮细胞专用培养基（含5% FBS+血管生成因子组合）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约36 - 60小时（与细胞密度及培养条件相关）
- 供应限制：仅供科学研究，禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃快速解冻，加入3mL预温培养基轻柔混匀；培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱1小时恢复
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐初始密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）；37℃消化30 - 60秒，显微镜下观察边缘卷曲立即终止
- 注意事项：严格控制消化时间（防止VE - cadherin蛋白降解）；首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清程序冻存液（含8% DMSO+海藻糖）
- 细胞密度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL（离心后重悬）
- 冻存步骤：梯度降温：4℃平衡30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证：复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能验证：CD31免疫荧光染色（P5代阳性率需＞98%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）；到货72小时内证实微生物污染（需提供检测证据）；细胞活性低于承诺标准（活力检测方法需一致）；血管内皮标志物鉴定不符合描述
- 免责条款：未按手册进行传代操作导致细胞状态异常；使用非指定培养基或未包被培养器皿；冻存细胞未经梯度降温直接放入液氮；收货后未及时处理导致细胞活性下降（注：所有数据基于C57BL/6品系小鼠原代细胞验证，建议使用胶原包被培养器皿，定期检测vWF因子表达水平）
