一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠主动脉外膜成纤维细胞(Mouse Aortic Adventitial Fibroblasts)
细胞别称:MAoAF;主动脉外膜成纤维细胞;血管外膜成纤维细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
组织来源:主动脉外膜层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被表面)
细胞形态:长梭形或纺锤状,单层排列时呈网状结构
细胞代数:P3 - P8(确保细胞功能稳定性及低传代变异风险)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+碱性成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及海藻糖保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~36 - 60小时(依赖细胞密度及培养基活性)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物制药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻后,加入3mL预温培养基轻柔混匀离心。
培养瓶:75%酒精擦拭外壁,静置培养箱4小时恢复代谢活性。
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)。
传代比例:1:2至1:3(最佳接种密度4×10³ cells/cm²)。
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含0.1%胶原酶辅助消化)。
37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察到细胞间隙扩大后终止反应。
注意事项:避免剧烈吹打导致细胞机械损伤,首次换液需在消化后18小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20%胎牛血清替代物)。
细胞密度:冻存浓度1 - 1.5×10⁶ cells/mL。
冻存步骤:离心后重悬细胞,分装至冻存管。
梯度降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
复苏验证:台盼蓝染色存活率≥85%,CCK - 8检测P5代细胞增殖曲线符合标准。
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度监控显示超温(需提供全程温度记录截图)。
2. 到货48小时内证实微生物污染(需提交污染样本检测结果)。
3. 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色影像证据)。
4. 细胞STR鉴定与申报信息不一致。
不予重发情形:
1. 客户未使用指定包被培养瓶导致贴壁失败。
2. 自行修改培养基配方引发细胞功能异常。
3. 解冻后未及时接种造成细胞活性丧失。
4. 未按要求执行传代操作导致细胞老化。