一、细胞基本属性
1. 细胞名称：小鼠心肌成纤维细胞（Mouse Cardiac Fibroblasts）
2. 细胞别称：心肌成纤维细胞；心脏间质细胞
3. 种属来源：小鼠（Mus musculus）
4. 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无心脏疾病史）
5. 组织来源：心脏组织（心室及心房分离）
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
7. 细胞形态：长梭形或星形，贴壁后呈不规则伸展
8. 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
9. 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+1%青霉素/链霉素+2mM L - 谷氨酰胺）
11. 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：约36 - 48小时（依赖培养密度及血清浓度）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基混匀离心后接种。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，置于培养箱静置4小时平衡后再换液。
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）。
3. 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）。
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）。
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞间隙增大后立即终止。
5. 注意事项
- 避免消化过度（易导致细胞膜损伤）。
- 传代后6小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90% FBS）。
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管。
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
4. 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%为合格）。
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞应维持典型成纤维细胞表型）。
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供温度记录或干冰余量证明）。
- 3天内证实支原体或细菌污染（需提供第三方检测报告）。
- 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法复检）。
- 种属鉴定与描述不符（需提供STR比对结果）。
2. 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过48小时。
- 使用非推荐培养基或未添加必需生长因子。
- 未按规范进行消化或冻存导致细胞损伤。
- 未定期检测支原体污染而引发实验偏差。
