一、细胞基本属性
1. 细胞名称：小鼠心室心肌细胞（Mouse Ventricular Cardiomyocytes）
2. 细胞别称：心室肌细胞；心肌细胞；心脏肌细胞
3. 种属来源：小鼠（Mus musculus）
4. 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无心脏疾病史）
5. 组织来源：心室心肌组织
6. 生长特性：贴壁生长（需0.1%明胶包被培养表面）
7. 细胞形态：梭形或多角形，可见自发性节律性收缩
8. 细胞代数：P1 - P3（原代细胞传代次数有限，建议低代使用）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：心肌细胞专用培养基（含10% FBS+心肌细胞生长补充剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：原代细胞增殖能力有限，主要维持功能特性
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱1小时平衡后更换新鲜培养基
2. 传代标准：细胞融合度达70% - 80%（原代细胞建议及时传代避免过度生长）
3. 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）
4. 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落，镜下确认后立即终止
5. 注意事项：
- 消化终止时建议使用含血清培养基充分中和
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿，减少机械应力影响
- 定期检测心肌特异性标志物（如肌钙蛋白T）维持特性
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及能量代谢保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤：
- 离心后轻柔重悬细胞于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
4. 复苏验证：
- 复苏后立即检测存活率（台盼蓝染色法≥85%）
- 功能验证：钙离子成像检测收缩功能（P2代细胞应保持节律性响应）
四、售后服务承诺
1. 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内经PCR证实微生物污染（细菌/真菌/支原体）
- 细胞复苏存活率低于承诺标准（附检测图像）
- 细胞特异性标志物检测不符合技术参数
2. 不予重发情形：
- 未按操作指南进行培养基质预处理
- 使用非指定培养基或擅自调整添加剂比例
- 细胞传代超过推荐代数（P3以上）导致的特性丢失
- 未在液氮保存条件下进行长期存储导致的细胞失效
