一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠肺微血管周细胞(Mouse Pulmonary Microvascular Pericytes)
- 细胞别称:MPMVPC;肺周细胞;微血管周细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体筛选无肺部疾病史)
- 组织来源:肺组织微血管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖特定细胞外基质涂层)
- 细胞形态:星形或长梭形,贴壁后呈现典型分支状结构
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Pericyte Growth Medium(含5% FBS +周细胞特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养密度与基质条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱2小时平衡。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含钙镁离子缓冲液)。
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:
- 避免机械吹打过度(防止损伤细胞伪足)。
- 首次换液需在传代后48小时进行(适应期延长)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞膜稳定剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%为合格)。
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持收缩蛋白表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 7天内证实支原体/真菌污染(需提供检测报告)。
- 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)。
- 物种鉴定与承诺不符(需提供STR比对结果)。
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时。
- 使用非指定培养基或血清导致功能异常。
- 未按规范进行细胞传代(如过度消化或接种密度过低)。
- 未预留备份细胞用于污染复检。
(注:以上内容基于科研级细胞标准流程,具体操作需结合实验室规范。)