一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠肺巨噬细胞（Mouse Pulmonary Macrophages）
- 细胞别称：MPM；肺组织巨噬细胞；肺泡巨噬细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（品系C57BL/6，6 - 8周龄，性别不限）
- 组织来源：肺组织分离（含肺泡及间质巨噬细胞）
- 生长特性：贴壁或半贴壁生长（依赖培养基组分及激活状态）
- 细胞形态：静息态呈圆形或梭形，激活后伸展伪足，具有吞噬特性
- 细胞代数：原代细胞（P0）或永生化细胞系（如MH - S细胞，传代范围P3 - P15）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640基础培养基（含10% FBS + 1%双抗+ 10ng/mL M - CSF）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），- 150℃以下长期保存
- 增殖特性：原代细胞增殖能力有限，永生化细胞系倍增时间约24 - 48小时
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床、药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基（含M - CSF）
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：贴壁细胞融合度达80% - 90%（原代细胞建议直接收集上清悬浮细胞）
- 传代方法：
- 使用细胞刮轻柔刮取贴壁细胞（原代）或0.25%胰酶 - EDTA短时消化（永生化细胞系）
- 终止消化后离心，重悬接种至新培养瓶
- 接种密度：原代细胞推荐5×10^4 cells/cm²；永生化细胞系按1:3比例传代
- 注意事项：
- 原代细胞避免频繁传代（功能易丧失）
- 激活实验需添加LPS（100ng/mL）或IFN - γ（20ng/mL）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 90% FBS）
- 冻存密度：1×10^6 - 5×10^6 cells/mL（高密度提升复苏存活率）
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温：4℃30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：FITC - dextran吞噬实验或流式检测表面标志物（CD11b/F4/80阳性率≥90%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测证据）
- 永生化细胞系STR鉴定与数据库不匹配
- 原代细胞表面标志物检测阴性（流式报告CD68阳性率＜80%）
- 免责条款：
- 客户未按推荐培养基培养（如缺失M - CSF导致细胞凋亡）
- 原代细胞冻存后复苏（仅限新鲜分离细胞直接使用）
- 永生化细胞系传代超过P15导致功能异常
- 未进行内毒素检测直接用于免疫相关实验
