一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠肺成纤维细胞(Mouse Lung Fibroblasts)
- 细胞别称:MLF;肺成纤维细胞;成纤维样细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:6-8周龄健康小鼠(性别不限,供体筛选无肺部疾病史)
- 组织来源:肺组织间质分离
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被)
- 细胞形态:长梭形或不规则三角形,贴壁伸展后呈放射状排列
- 细胞代数:P3 - P8(经功能验证确保活性及增殖能力)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(与传代密度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶经表面消毒后静置于培养箱平衡1小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察到细胞间隙增大后立即终止反应。
- 注意事项:需严格控制消化时间以保护细胞膜完整性;传代后12小时内避免频繁观察扰动细胞贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及蛋白保护剂)
- 细胞密度:推荐冻存浓度1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,分装至冻存管后采用程序降温盒梯度冷冻(4℃→ - 20℃→ - 80℃→液氮)。
- 复苏验证:复苏后活率需≥90%(台盼蓝染色法);P5代细胞需通过胶原分泌能力检测验证功能稳定性。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供包装完整性证明)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞活率低于承诺标准(需提供染色检测原始图像)
- 种属鉴定结果与标识不符
- 不予重发情形:
- 未按规范进行细胞复苏及传代操作
- 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子
- 因反复冻融导致的细胞损伤
- 未执行标准支原体检测流程直接进行实验