一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠支气管平滑肌细胞(Mouse Bronchial Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:mBSMC;支气管平滑肌细胞;气道平滑肌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无呼吸道疾病史)
- 组织来源:支气管平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤状,平行排列成束状结构
- 细胞代数:P3 - P6(保证收缩功能与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+平滑肌细胞特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养基成分与细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)。
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:
- 避免机械刮取(保护细胞收缩功能完整性)。
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及低温保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。
- 梯度降温:4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃ 24h→液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后48小时活率检测(台盼蓝染色活率≥90%)。
- 功能验证:钙离子荧光检测(P4代细胞需维持钙响应能力)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)。
- 7日内经检测证实支原体污染(需提供荧光PCR报告)。
- 细胞活率低于85%(提供染色图片及显微影像)。
- α - SMA免疫荧光鉴定与描述不符。
- 不予重发情形:
- 收货后超72小时未进行复苏操作。
- 自行修改培养基配方导致细胞表型丢失。
- 未使用推荐包被基质影响细胞贴壁。
- 未按规范进行细胞收缩功能验证。