一、细胞基本属性
- 细胞名称: 小鼠支气管上皮细胞（Mouse Bronchial Epithelial Cells）
- 细胞别称: MBE细胞；支气管上皮细胞；气道上皮细胞
- 种属来源: 小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别: 健康成年小鼠（性别不限，供体筛选无呼吸道疾病史）
- 组织来源: 支气管组织
- 生长特性: 贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态: 典型多角形或铺路石样单层，接触抑制后形成紧密连接
- 细胞代数: P3 - P8（确保功能稳定性和低传代变异）
- 细胞规格: 1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基: 支气管上皮细胞专用培养基（含2% FBS+上皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件: 气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件: 无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间: 约24 - 48小时（依赖培养密度与基质包被条件）
- 供应限制: 仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁后静置于培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准: 细胞融合度达80% - 90%（常规每2 - 3天传代一次）
- 传代比例: 1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化30秒至1分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项:
- 避免消化过度（防止紧密连接蛋白降解）。
- 传代后12小时内更换新鲜培养基以提升贴壁率。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方: 无血清冻存液（含10% DMSO及细胞膜稳定剂）
- 细胞密度: 冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）。
- 功能验证：跨上皮电阻检测（TEER值需符合批次标准）
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）。
- 收货3日内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）。
- 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法）。
- 物种鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形:
- 客户未在48小时内完成细胞复苏。
- 使用非指定培养基或未进行基质包被。
- 自行改良冻存方法导致细胞损伤。
- 未按操作指南进行传代或功能验证。
