一、细胞基本属性
细胞名称
小鼠气管上皮细胞(Mouse Tracheal Epithelial Cells)
细胞别称
MTEpiC;气管上皮细胞;气管纤毛上皮细胞
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
健康成年鼠(性别不限,供体筛选无呼吸道疾病史)
组织来源
气管上皮组织
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
紧密连接单层,典型多角形或立方状,可见纤毛分化
细胞代数
P3 - P8(确保分化功能与遗传稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Epithelial Cell Growth Medium(含2% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约36 - 48小时(依赖培养密度与基质包被条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
• 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱2小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:2至1:4(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
• 37℃消化1 - 1.5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
• 消化后需完全中和胰酶(残留酶影响细胞贴壁)
• 首次换液时间建议为传代后12小时(促进极性重建)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
• 梯度降温:4℃30分钟→ - 20℃2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证
• 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥90%)
• 功能验证:纤毛运动活性检测(P5代细胞应维持基础纤毛摆动功能)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实支原体或真菌污染(需提供荧光染色或PCR报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图片)
4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形
1. 收货后超72小时未进行复苏操作
2. 使用非指定培养基导致细胞分化异常
3. 自行修改冻存液配方引发细胞损伤
4. 未按规范进行无菌操作导致污染扩散