一、细胞基本属性
细胞名称
小鼠II型肺泡上皮细胞(Mouse Alveolar Type II Epithelial Cells)
细胞别称
AT2细胞;肺泡II型上皮细胞;肺上皮细胞
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
健康成年小鼠(性别不限,无特定病原体)
组织来源
肺组织肺泡区
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白或基质胶涂层)
细胞形态
立方形,胞质内含层状体结构,核质比高
细胞代数
P3 - P6(推荐使用代数以保证表面活性蛋白分泌功能)
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM/F12培养基(含10% FBS + 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂 + 10ng/mL KGF)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(依赖培养密度及涂层条件)
供应限制
仅限科学研究,不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔离心去冻存液
• 培养瓶:酒精消毒后置入培养箱平衡1小时,再更换新鲜培养基
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(避免过度生长导致分化)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
• 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
• 消化后轻柔吹打避免损伤层状体结构
• 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后梯度降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 过夜 → 液氮储存
复苏验证
• 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
• 功能验证:qPCR检测SP - C表达或层状体染色(P3代细胞应维持分化特性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
3. 细胞存活率低于85%(依据台盼蓝染色结果)
4. 物种鉴定与描述不符(STR比对结果异常)
不予重发情形
1. 解冻后超48小时未进行贴壁培养
2. 使用非指定培养基或未添加必要生长因子
3. 未按规范进行胶原涂层导致细胞脱落
4. 实验操作不当引发的交叉污染