一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠肺动脉外膜成纤维细胞(Mouse Pulmonary Adventitial Fibroblasts)
- 细胞别称:MPAF;肺动脉外膜成纤维细胞;血管外膜细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别均一化处理,供体无心血管疾病史)
- 组织来源:肺动脉外膜层分离
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型梭形或星形,单层培养呈放射状排列
- 细胞代数:P3 - P10(经端粒酶活性检测确保增殖潜能)
- 细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:Fibroblast Growth Medium(含10% FBS + 成纤维细胞特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(与细胞密度及传代次数相关)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体移植或基因治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱1小时适应环境
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐初始接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔拍打促进细胞脱落
- 注意事项:
- 避免消化时间过长(防止细胞外基质蛋白降解)
- 传代后12小时内避免移动培养器皿以保证贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时活率检测(台盼蓝拒染率≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认细胞特性
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 到货7日内证实支原体污染(需提供检测原始数据)
- STR比对结果与数据库不符
- 原代细胞标志物表达缺失(需提供流式检测报告)
- 不予重发情形:
- 未按规范进行细胞复苏前平衡
- 使用非指定培养基导致形态异常
- 超低温冰箱断电导致冻存管反复冻融
- 未在P10代以内完成实验体系建立