一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠肺微血管内皮细胞(Mouse Pulmonary Microvascular Endothelial Cells)
- 细胞别称:MPMEC;肺微血管内皮细胞;肺微血管内皮原代细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别及品系可定制,供体筛选无肺部病理特征)
- 组织来源:肺组织微血管段精细分离
- 生长特性:贴壁依赖性生长(需包被胶原或纤连蛋白基质)
- 细胞形态:单层铺展呈多角形,接触抑制后形成典型鹅卵石样排列
- 细胞代数:原代培养P0至P3代(推荐P1 - P2代用于实验,确保功能稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:专用内皮细胞培养基(含5% FBS+肝素+ECGS生长因子)
- 培养条件:气相5% CO₂,恒温37℃,湿度95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(受基质包被及传代密度影响)
- 供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管接收后立即37℃水浴解冻,轻柔转移至含预热培养基的离心管,离心后重悬接种
- 培养瓶收货后酒精擦拭表面,静置于培养箱1小时待温度平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 采用0.25%胰酶-EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止反应
- 注意事项:
- 避免消化过度损伤细胞膜完整性
- 首次换液需在接种后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
- 功能验证:CD31免疫荧光染色及FITC - 葡聚糖跨膜通透性实验
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
- 复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法定量)
- 细胞种属鉴定与合同不符(STR检测报告为证)
- 不予重发情形:
- 超时复苏(收货后未及时处理超过48小时)
- 自行修改培养基配方导致细胞异常
- 违反无菌操作引发交叉污染
- 未按规范进行传代前基质包被处理
- 本产品符合ISO细胞培养质量标准,提供完整细胞鉴定报告及培养技术支持