一、细胞基本属性
- 细胞名称:LEC-1仓鼠卵巢细胞(LEC-1 Chinese Hamster Ovary Cells)
- 细胞别称:CHO - LEC1;仓鼠卵巢上皮细胞
- 种属来源:仓鼠(Cricetulus griseus)
- 年龄性别:健康成年仓鼠(性别不限,供体筛选无遗传缺陷史)
- 组织来源:卵巢组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质支持)
- 细胞形态:上皮样单层,高密度时呈铺路石样排列
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,保证遗传稳定性与功能表达)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Ham’s F12培养基(含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%抗生素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下液氮长期保存
- 倍增时间:~24 - 36小时(依赖培养基批次与培养密度)
- 供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或商业生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:避免消化时间过长导致膜蛋白损伤,传代后6小时内勿移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管,程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证:存活率≥90%(台盼蓝染色法),转染效率验证(P5代细胞应保持稳定表达特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 到货48小时内证实支原体污染(需第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(按规范操作验证)
- 物种鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形:
- 解冻后超72小时未进行培养
- 自行修改培养基配方导致生长异常
- 未按标准流程进行传代操作
- 未使用配套冻存液导致复苏失败