一、细胞基本属性
细胞名称：CHO/dhFr - 仓鼠卵巢细胞（二氢叶酸还原酶缺陷型）
细胞别称：CHO - K1/dhFr -；CHO/DHFR -；仓鼠卵巢悬浮细胞系
种属来源：中国仓鼠（Cricetulus griseus）
遗传背景：经基因改造导致二氢叶酸还原酶（DHFR）功能缺失
组织来源：卵巢组织
生长特性：贴壁或悬浮生长（根据培养体系调整）
细胞形态：贴壁状态呈上皮样多角形，悬浮培养时呈球形聚集体
细胞代数：推荐使用P15 - P25代（维持基因表达稳定性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：Ham's F - 12K培养基（含10%透析胎牛血清+2mM L - 谷氨酰胺+1%非必需氨基酸）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：90%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO+90%基础培养基），液氮长期保存
倍增时间：贴壁培养约20 - 24小时，悬浮培养约18 - 22小时
应用限制：专用于重组蛋白表达研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
贴壁培养：接种后静置48小时，避免频繁观察扰动细胞
传代标准：贴壁细胞融合度达80% - 90%，悬浮细胞密度达2×10^6 cells/mL
传代比例：贴壁培养1:5至1:10，悬浮培养按密度稀释至5×10^5 cells/mL
消化方法：
贴壁细胞使用0.25% Trypsin - EDTA消化3 - 5分钟
悬浮细胞直接离心收集后重悬分瓶
注意事项：
DHFR缺陷需维持选择压力（培养基不含次黄嘌呤/胸苷）
悬浮培养时需定期检测聚集体尺寸（建议≤200μm）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：基础培养基+10% DMSO+20%血清替代物
细胞密度：贴壁细胞1×10^7 cells/mL，悬浮细胞5×10^6 cells/mL
冻存步骤：
梯度降温程序：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
复苏验证：
复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
功能验证：重组质粒转染效率检测（P20代细胞应保持>70%转染率）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 到货干冰完全挥发导致细胞活性丧失（需提供包装完整性证明）
2. 7日内经PCR证实支原体污染或细菌污染
3. STR图谱与ATCC标准数据库偏离≥3个位点
不予重发情形：
1. 未使用指定选择培养基导致基因型漂移
2. 悬浮培养时机械搅拌速度超过200rpm造成物理损伤
3. 未定期进行DHFR基因缺失验证实验
4. 转染后超过10代未进行单克隆筛选
（注：本产品需配合MTX加压筛选系统使用，具体实验方案可提供技术指导文件）
