一、细胞基本属性
细胞名称:CTLA4 IG - 24中国仓鼠卵巢细胞(CTLA4 IG - 24 Chinese Hamster Ovary Cells)
细胞别称:CTLA4 - Ig稳定表达细胞株;CHO - CTLA4融合蛋白工程细胞
种属来源:中国仓鼠(Cricetulus griseus)
遗传背景:经基因工程改造稳定表达人CTLA4胞外域与IgG Fc段融合蛋白
组织来源:卵巢上皮细胞系
生长特性:贴壁生长(需胰酶消化传代)
细胞形态:典型上皮样多角形,单层贴壁呈铺路石状排列
细胞代数:P15 - P25(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:CD CHO培养基(含8mM L - 谷氨酰胺+1% HT Supplement+200μg/mL嘌呤霉素)
培养条件:气相:8% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO+海藻糖保护剂),液氮气相长期保存
传代周期:3 - 4天(接种密度1×10^4 cells/cm²时)
应用限制:仅限重组蛋白表达研究,不可用于活体实验或临床治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管复苏:37℃水浴震荡解冻≤2分钟,立即转移至预温培养基
培养瓶运输:观察培养基pH值(正常范围7.2 - 7.4)后静置培养
传代标准:融合度达90% - 95%时进行(过高密度影响蛋白表达效率)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂)
37℃消化3 - 5分钟,细胞边缘卷曲时轻拍瓶壁辅助脱落
注意事项:
传代后需维持200μg/mL嘌呤霉素筛选压力
换液时保留20%条件培养基以维持细胞适应性
定期检测支原体(每3个月PCR验证一次)
三、细胞冻存操作规范
冻存准备:对数生长期细胞(传代后48小时为最佳)
冻存密度:2×10^6 cells/mL(离心后去上清完全)
冻存程序:
程序降温仪分步冻存:-1℃/min降至-80℃
液氮长期储存前需完成气相平衡(≥4小时)
质检标准:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
表达量验证:复苏后第3代细胞需通过ELISA检测CTLA4 - Ig产量(≥2g/L)
四、售后服务承诺
质量保障:
随附STR鉴定报告(18个位点基因分型)
提供支原体检测阴性证明(ISO9001认证方法)
重发条款:
1.到货72小时内发现污染(需提供未开盖培养瓶照片)
2.复苏后活率<80%(需提供台盼蓝染色视频)
3.STR位点匹配率<95%
免责情形:
1.未按要求维持筛选压力导致质粒丢失
2.使用非指定培养基培养超过2个传代周期
3.解冻后未及时更换含筛选抗生素的培养基
4.擅自更改培养条件(如CO₂浓度或温度)导致的表达量下降
本产品严格遵循ISO细胞库管理规范,所有批次均通过无菌检测、支原体检测及功能验证,为重组蛋白表达研究提供标准化细胞模型。