一、细胞基本属性
- 细胞名称:BHK - 21(C - 13)仓鼠肾成纤维细胞
- 细胞别称:BHK细胞;仓鼠肾成纤维细胞
- 种属来源:叙利亚仓鼠(Mesocricetus auratus)
- 年龄性别:幼鼠(性别不限,供体经健康筛选)
- 组织来源:仓鼠肾脏组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞贴壁基质)
- 细胞形态:长梭形或多角形,贴壁后呈单层致密排列
- 细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数,保证增殖稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
- 培养基:DMEM基础培养基(含10% FBS + 2mM L - 谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),- 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖传代密度与培养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于37℃培养箱静置
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(常规每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 消化终止需立即加入含血清培养基
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO + 90% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:48小时内恢复贴壁及增殖活性
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货3天内证实细菌污染(需提供污染检测证据)
- 细胞复苏存活率低于85%
- 种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐培养基培养导致细胞异常
- 解冻后超72小时未进行贴壁培养
- 反复冻融或不当操作导致细胞损伤
- 未按要求进行支原体污染排查