一、细胞基本属性
细胞名称
CHO - K1悬浮细胞系(Chinese Hamster Ovary K1 Suspension Cell Line)
细胞别称
CHO - K1亚克隆系；中国仓鼠卵巢细胞K1悬浮型
种属来源
中国仓鼠(Cricetulus griseus)
细胞背景
源自中国仓鼠卵巢组织的上皮样细胞系，经亚克隆筛选获得悬浮生长特性
组织来源
卵巢组织
生长特性
悬浮生长(无需贴壁依赖，适应无血清悬浮培养体系)
细胞形态
球形单细胞悬浮，边界清晰，透光度高
细胞代数
P5 - P15(经多次传代验证，维持遗传稳定性与蛋白表达一致性)
细胞规格
1×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)或摇瓶预培养体系(密度≥2×10^6 cells/mL)
培养基
CD CHO培养基(含4mM L -谷氨酰胺及补料添加剂，无需额外添加血清)
培养条件
气相：8% CO₂+92%空气；温度：37℃；摇床转速：110 - 130 rpm(振幅25mm)
冻存条件
无血清细胞冻存液(含10% DMSO及抗冻蛋白)，液氮气相长期保存(- 196℃)
倍增时间
~20 - 24小时(对数生长期，pH与溶氧值稳定条件下)
应用范围
重组蛋白表达、病毒载体包装、抗体生产等生物制药研究
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，直接转移至预温培养基中离心(200×g，3分钟)
摇瓶培养物：检查浑浊度与pH值，按1:3比例扩增至新鲜培养基
传代标准
细胞密度达4×10^6 - 6×10^6 cells/mL(活率≥95%时传代)
传代方法
离心收集细胞，重悬于新鲜培养基，初始接种密度2×10^5 cells/mL
无需消化酶处理，直接稀释扩增
关键参数
溶氧维持30% - 60%，pH 6.8 - 7.2(通过CO₂混合气体与补碱调节)
定期检测代谢副产物(如乳酸、铵离子)浓度
注意事项
避免剧烈震荡导致细胞机械损伤
传代后24小时内监测细胞活率与聚集状态
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO、1%海藻糖及渗透保护剂)
冻存密度
5×10^6 - 1×10^7 cells/mL(高密度冻存提升复苏效率)
冻存步骤
离心收集对数期细胞，缓慢滴加冻存液混匀
程序降温：4℃平衡30分钟 → 专用冻存盒-80℃过夜 → 转移至液氮
复苏验证
复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法)
蛋白表达稳定性检测：通过EGFP报告基因或目标重组蛋白产量验证
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供温度记录仪数据)
2. 到货72小时内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏后活率低于85%(经双方同步检测确认)
4. 细胞身份鉴定不符(STR图谱或同工酶分析)
免责情形
1. 未按推荐参数进行pH或溶氧控制导致细胞凋亡
2. 使用非配套培养基或补料添加剂引发代谢异常
3. 培养设备故障(如CO₂供应中断、摇床停转超过2小时)
4. 未执行定期传代导致细胞进入衰退期
