人谷氨酰胺（GLU）ELISA

人谷氨酸(GLU)说明书（高）.pdf

一、产品基本信息

产品名称：人谷氨酰胺（GLU）ELISA试剂盒
规格：48T/96T
检测原理：本试剂盒采用竞争抑制酶联免疫吸附法（ELISA），专门设计用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆或其他相关生物样本中的谷氨酰胺（GLU）水平。

• 实验过程中，酶标板预包被特异性抗GLU抗体。样本中的GLU与酶标抗原竞争结合有限量的抗体，未结合成分经洗涤去除后，加入显色底物，颜色深浅与样本中GLU浓度成反比。

• 通过酶标仪测定特定波长下的吸光度（OD值），结合标准曲线计算样本中GLU浓度。

反应类型：竞争法
反应时间：约4-5小时
反应性：高度特异，针对人谷氨酰胺（GLU）
检测方法：比色法
灵敏度：可检测低于试剂盒最低浓度标准品的GLU含量
样本体积：50μL-100μL
样本类型：血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆或其他生物样本
特异性：与其他氨基酸或相关代谢物无显著交叉反应
重复性：板内及板间变异系数（CV）均＜10%

二、样本处理要求

1. 血清/血浆：

• 采集后离心分离，避免溶血或脂血干扰。

• 长期保存需置于-80℃，避免反复冻融。

2. 细胞培养上清：

• 收集对数生长期细胞上清，避免细胞碎片污染。

• 分装后标记细胞类型、培养条件及日期，-80℃保存。

3. 组织匀浆：

• 新鲜或冷冻组织需去除脂肪、血液等杂质，加入生理盐水或专用缓冲液匀浆。

• 离心后取上清，-80℃保存，避免反复冻融。

三、精密度与回收率

• 精密度：低、中、高浓度样本的批内及批间CV均＜10%，确保结果稳定性。

• 回收率：在血清、血浆、细胞培养上清等样本中添加已知浓度GLU标准品，回收率范围为85%-115%（具体数值以实际测试为准），且不同稀释度下线性良好。

四、试剂盒组成及保存

48孔配置：

• 说明书×1

• 封板膜×2

• 密封袋×1

• 酶标包被板×1（48孔）

• 标准品（0.3mL×6管）

• 酶标试剂×1（5mL）

• 样品稀释液×1（6mL）

• 显色剂A/B液×1（各6mL）

• 终止液×1（3mL）

• 浓缩洗涤液×1（30mL，20×）
  96孔配置：各组分数量加倍。
  保存条件：2-8℃避光保存，严禁反复冻融。

五、注意事项

1. 实验前所有试剂需恢复至室温并混匀。

2. 严格遵循操作步骤，避免交叉污染。

3. 试剂瓶盖需密封，防止蒸发或污染。

4. 试剂体积以实际发货说明书为准，分装时可能略有盈余。

六、操作步骤简述

1. 准备：试剂及样本恢复至室温，准备实验设备。

2. 加样：标准品孔加入梯度浓度标准品，样本孔加入待测样本。

3. 加酶：每孔加入适量酶标试剂。

4. 温育：封板后37℃恒温孵育。

5. 洗涤：弃液后用洗涤液清洗5次，拍干。

6. 显色：加入显色剂A/B，避光显色。

7. 终止：加入终止液，15分钟内测定OD值（450nm）。

七、试验所需自备物品

• 酶标仪（450nm滤光片）

• 高精度移液器及吸头

• 37℃恒温箱

• 双蒸水/去离子水

• 吸水纸

• 离心机（用于细胞培养上清及组织匀浆处理）

八、结果判断与分析

1. 标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，确保R²＞0.99。

2. 浓度计算：根据样本OD值在标准曲线上查得对应GLU浓度。

3. 统计分析：可进行均值、标准差、t检验或方差分析等。

注：本试剂盒仅供科研使用，操作需符合实验室规范。