3-磷酸甘油醛脱氢酶(NADH-GAPDH)试剂盒

一、产品简介

3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADH - GAPDH）是生物体内参与糖酵解等重要代谢途径的关键酶。

它在细胞能量代谢过程中发挥着重要的作用，对维持细胞内的能量平衡和正常生理功能至关重要。

定义与功能：

定义：3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADH - GAPDH）是一种能够催化 3 - 磷酸甘油醛氧化并磷酸化生成 

1,3 - 二磷酸甘油酸，同时使 NAD⁺ 还原为 NADH 的酶。

功能：在糖酵解过程中，NADH - GAPDH 通过催化 3 - 磷酸甘油醛的氧化反应，推动糖酵解途径的进行。

为细胞提供能量。同时，生成的 NADH 可参与后续的呼吸链反应，进一步产生 ATP 供能。

催化机制：

NADH - GAPDH 催化 3 - 磷酸甘油醛与无机磷酸结合，同时将 NAD⁺ 还原为 NADH，生成 1,3 - 二磷酸甘油酸。

在这个反应中，3 - 磷酸甘油醛作为底物提供电子，NAD⁺ 作为电子受体被还原。

活性测定方法：

本试剂盒采用分光法测定 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADH - GAPDH）的酶活性大小。

通过检测特定波长下 NADH 的生成速率来反映酶的活性，NADH 在该波长处有特征吸收峰。

其生成速率与 NADH - GAPDH 的酶活性成正比。通过测定反应体系中 NADH 的生成量，

可以间接计算出 NADH - GAPDH 的酶活性。

重要性：

NADH - GAPDH 作为糖酵解途径中的关键酶，其活性和存在对于细胞的能量代谢、

维持正常的生理功能具有重要意义。通过不断催化 3 - 磷酸甘油醛的氧化反应，

NADH - GAPDH 为细胞提供了持续的能量供应，保障了细胞的正常生长和代谢。

二、所需的仪器和用品

进行 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADH - GAPDH）活性测定实验时，需要以下仪器和用品：

分光光度计

用途：用于测量 NADH 在特定波长下的光吸收值。分光光度计具有高精度和高灵敏度的特点。

能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。

注意事项：在使用前需要预热分光光度计，并调节波长到检测所需的特定波长。

同时，要保持比色皿洁净无异物遮盖，以确保测量结果的准确性。

比色皿

用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于进行分光光度测定。比色皿具有透明度高、

光吸收性能好的特点，适合用于分光测定。

注意事项：在使用前需要确保比色皿干净无污染，并且样品和试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADH - GAPDH）。

低温条件有助于保持酶的活性，减少其在处理过程中的损失。

注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间等），并确保离心机已预冷至适当温度。

在离心过程中，要密切关注离心机有无异常声音等状况，若出现异常状况应立即停止离心。

可调式移液器

用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量。

确保实验的准确性和重复性。

注意事项：在使用可调式移液器时，需要确保其已进行校准，并且移液过程中要避免气泡和溅出。

在移取不同样品或试剂时，要及时更换移液器头，以防止交叉污染。

研钵

用途：用于研磨样品，使其达到实验所需的粒度。在 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADH - GAPDH）活性测定实验中，

研钵可能用于研磨生物组织等样品，以便提取其中的酶。

注意事项：在使用研钵时，要保持其干净无污染，并确保研磨过程中样品不会受到污染。

冰

用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解或变性。在 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADH - GAPDH）活性测定实验中，

冰可能用于冷却样品或试剂，以确保实验的准确性。

注意事项：在使用冰时，要确保其干净无污染，并及时更换以保持其低温效果。