一、产品简介
磷酸果糖激酶（PFK），又名果糖 - 6 - 磷酸激酶，是糖酵解途径中的关键酶。它广泛存在于生物细胞内，对调节糖代谢的速率起着至关
重要的作用。
定义与功能：
定义：PFK是一种能够催化果糖 - 6 - 磷酸和ATP反应生成果糖 - 1,6 -
二磷酸和ADP的酶。功能：在糖酵解过程中，PFK通过催化果糖 - 6 -
磷酸的磷酸化反应，促进糖酵解的进行，为细胞提供能量。
同时，它还是糖代谢的重要调节点，能够根据细胞的能量需求调节糖
酵解的速率。
催化机制：
PFK催化果糖 - 6 - 磷酸与ATP反应，生成果糖 - 1,6 - 二磷酸和ADP，
这一反应在糖酵解途径中是限速步骤。ATP作为磷酸基团的供体，将
磷酸基团转移给果糖 - 6 - 磷酸，使其转变为果糖 - 1,6 - 二磷酸。
活性测定方法：
本试剂盒采用微板法测定PFK的酶活性大小。通过特定的显色反应或
检测产物的生成量来间接反映PFK的酶活性。在反应过程中，底物与
酶作用后产生特定的可检测物质，根据其在特定波长下的吸光度变化
来计算酶活性。
重要性：
PFK作为糖酵解途径中的关键酶，其活性和存在对于细胞的能量代谢、
维持正常的生理功能具有重要意义。通过调节糖酵解的速率，PFK为
细胞提供了持续的能量供应，保障了细胞的正常生长和代谢。
二、所需的仪器和用品
进行PFK活性测定实验时，需要以下仪器和用品：
酶标仪
用途：用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。酶标仪具有高精
度和高灵敏度的特点，能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。
注意事项：在使用前需要预热酶标仪，并调节波长到合适的检测波长。
同时，要保持孔板洁净无异物遮盖，以确保测量结果的准确性。
96孔板（UV板）
用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。UV板具有透
明度高、光吸收性能好的特点，适合用于紫外光区的测定。
注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，并且样品和试
剂的加入量要准确。
低温离心机
用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取PFK。低温条件有助
于保持PFK的活性，减少其在处理过程中的损失。
注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间等），并确
保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中，要密切关注离心机有无
异常声音等状况，若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的
实验需求调整移液量，确保实验的准确性和重复性。
注意事项：在使用可调式移液器时，需要确保其已进行校准，并且移
液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时，要及时更换
移液器头，以防止交叉污染。
研钵
用途：用于研磨样品，使其达到实验所需的粒度。在PFK活性测定实
验中，研钵可能用于研磨组织等样品，以便提取其中的PFK。
注意事项：在使用研钵时，要保持其干净无污染，并确保研磨过程中
样品不会受到污染。
冰
用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解或变性。在PFK
活性测定实验中，冰可能用于冷却样品或试剂，以确保实验的准确性。
注意事项：在使用冰时，要确保其干净无污染，并及时更换以保持其
低温效果。
