一、产品简介
果糖激酶(FK)是一种在糖类代谢过程中发挥重要作用的酶,它能够催化果糖磷酸化反应,在生物体内的能量代谢和碳水
化合物代谢途径中扮演着关键角色。
定义与功能:
定义:果糖激酶(FK)是催化果糖与 ATP 反应,生成果糖 - 6 -
磷酸和 ADP 的酶。功能:FK 通过催化果糖的磷酸化,使得果
糖能够顺利进入细胞内的糖代谢途径,维持细胞内糖类物质
的正常代谢水平,为细胞提供能量和合成生物大分子的原料。
催化机制:
FK 催化果糖与 ATP 发生反应,ATP 提供磷酸基团,将果糖磷
酸化为果糖 - 6 - 磷酸,同时 ATP 自身转变为 ADP。这一反应
是细胞内果糖代谢的起始步骤,对于调节果糖在细胞内的代
谢流向至关重要。
活性测定方法:
本果糖激酶(FK)试剂盒采用微板法进行测定。该方法通过
检测反应体系中特定产物或底物的变化情况来计算 FK 的酶
活性大小。在反应过程中,特定的底物或产物会在特定波长
下产生特征吸收变化,通过酶标仪测定该波长下吸光度的变
化速率,进而根据一定的公式计算出 FK 的酶活性。
重要性:
果糖激酶(FK)在生物体内糖类代谢过程中具有重要意义。
其活性和存在对于维持细胞内糖类代谢的平衡、保证细胞的
能量供应以及生物大分子的合成具有关键作用。通过高效催
化果糖的磷酸化反应,FK 使得果糖能够充分参与到细胞的各
种生理过程中,保障了生物体的正常生长、发育和代谢功能。
二、所需的仪器和用品
进行果糖激酶(FK)活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。酶标仪
具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波
长下的吸光度值,从而为计算 FK 酶活性提供数据支持。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的
测定值。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结
果的准确性。
96 孔板(UV 板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV
板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区
的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且
样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取 FK。低温条
件有助于保持 FK 的活性,减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),
并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关
注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止
离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根
据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,
并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂
时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在 FK 活性
测定实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,以便提取
其中的 FK。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研
磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。
在 FK 活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保
实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换
以保持其低温效果。