3-磷酸甘油酸激酶(PGK)活性测定试剂盒

糖酵解系列

货号

规格

检测方法

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XM-F-TC00948样紫外法1961
XM-W-TC00996样微板法3192


一、产品简介

3 - 磷酸甘油酸激酶(PGK,EC 2.7.2.3)是一种在生物体内参与糖酵解和糖异生途径的关键酶。它广泛存在于各种生物细胞中,在能

量代谢过程中起着至关重要的作用。


定义与功能:

定义:PGK是一种能够催化1,3 - 二磷酸甘油酸和ADP反应生成3

 - 磷酸甘油酸和ATP的酶。

功能:在糖酵解和糖异生途径中,PGK通过催化上述反应,实现

能量的转移和物质的转化,对维持细胞内能量平衡和正常代谢水

平起着关键作用。ATP是细胞内重要的能量载体,为细胞的各种生

命活动提供能量。


催化机制:

PGK催化1,3 - 二磷酸甘油酸和ADP反应生成3 - 磷酸甘油酸和ATP

,这一反应在糖酵解和糖异生途径中至关重要。ADP作为磷酸基

团的受体,接受1,3 - 二磷酸甘油酸上的磷酸基团,生成ATP,同

时1,3 - 二磷酸甘油酸转化为3 - 磷酸甘油酸。


活性测定方法:

本试剂盒采用微板法进行PGK活性测定。通过特定的反应体系,

在特定波长下检测反应产物的生成速率来计算PGK的酶活性大小

。反应产物在特定波长处有特征吸收峰,其生成速率与PGK的酶活

性成正比。通过测定反应体系中反应产物的生成量,可以间接计

算出PGK的酶活性。


重要性:

PGK作为糖酵解和糖异生途径中的关键酶,其活性和存在对于细

胞的能量代谢、维持正常的生理功能以及适应不同的生理状态具

有重要意义。通过不断催化反应的进行,PGK为细胞提供了持续的

能量支持,保障了细胞的正常生长和代谢。


二、所需的仪器和用品

进行PGK活性测定实验时,需要以下仪器和用品:


酶标仪

用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。酶标仪具有

高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸

光度值。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到特定波长。

同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。


96孔板

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品

和试剂的加入量要准确。


低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取PGK。低温条件

有助于保持PGK的活性,减少其在处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),

并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关注离

心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。


可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不

同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并

且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要

及时更换移液器头,以防止交叉污染。


研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在PGK活性测

定实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,以便提取其中的

PGK。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过

程中样品不会受到污染。


用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在

PGK活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验

的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保

持其低温效果。