一、细胞基本属性
- 细胞名称：PAC2斑马鱼胚胎成纤维细胞
- 细胞别称：Zebrafish Embryonic Fibroblasts PAC2；PAC2细胞
- 种属来源：斑马鱼（Danio rerio）
- 发育阶段：胚胎期（受精后24 - 48小时）
- 组织来源：斑马鱼胚胎中胚层组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或明胶包被培养器皿）
- 细胞形态：典型成纤维细胞样，呈纺锤形或星状，单层贴壁分布
- 细胞代数：P5 - P10（保持基因组稳定性与增殖活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Leibovitz’s L - 15培养基（含10% FBS + 1%双抗）
- 培养条件：气相：空气；温度：28℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），- 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖传代密度与培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：28℃水浴快速解冻，加入预热培养基混匀离心去冻存液
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱30分钟平衡温度
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 28℃消化30秒 - 1分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 避免消化过度（影响细胞贴壁能力）
- 传代后6小时补充新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 转入液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：细胞增殖能力检测（P5代细胞应保持稳定分裂活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货3天内证实细菌/真菌污染（需提供显微图像证据）
- 复苏后存活率低于85%（台盼蓝染色法）
- 物种鉴定结果与描述不符（需提供STR分析报告）
- 不予重发情形：
- 未按28℃条件培养导致细胞状态异常
- 使用非推荐培养基或未预包被培养器皿
- 细胞冻存后未经梯度降温直接投入液氮
- 未按要求进行细胞传代密度控制引发老化
