一、细胞基本属性
细胞名称
OAR - L1绵羊肺成纤维细胞（原代永生化）
细胞别称
绵羊肺成纤维细胞永生化株；Ovis aries肺成纤维细胞系
种属来源
绵羊（Ovis aries）
年龄性别
健康成年绵羊（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）
组织来源
肺组织成纤维细胞分离培养
生长特性
贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
细胞形态
典型成纤维细胞样，呈长梭形或不规则三角形
细胞代数
永生化后稳定传代（推荐使用代数P10 - P20）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（无血清冻存体系）
培养基
Fibroblast Growth Medium（含10% FBS + 成纤维细胞特异性生长因子）
培养条件
气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
倍增时间
~24 - 48小时（与传代密度及培养基批次相关）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
· 培养瓶：表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例
1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
· 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
· 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
· 避免消化过度（损伤细胞表面整合素受体）
· 首次传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 消化离心后重悬于预冷冻存液
· 程序降温：4℃ 30min→ - 20℃ 1h→ - 80℃ 12h→液氮储存
复苏验证
· 复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
· 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P15代细胞应保持典型标志物表达）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 到货7日内经检测确认支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供明场显微照片）
4. 物种鉴定结果与申报不符
不予重发情形
1. 未按规范进行胶原基质包被导致细胞脱落
2. 使用含抗生素培养基掩盖潜在污染
3. 未定期进行STR鉴定导致遗传漂移
4. 液氮保存设备故障导致的反复冻融
