一、细胞基本属性
细胞名称:MDCK狗肾转化细胞(Madin - Darby Canine Kidney Cells)
细胞别称:MDCK细胞;犬肾上皮细胞
种属来源:犬(Canis lupus familiaris)
组织来源:成年健康犬肾脏组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞间连接形成单层)
细胞形态:典型上皮样多角形,融合后呈紧密单层排列
细胞代数:P5 - P10(推荐使用代数以维持稳定表型)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:MEM培养基(含10% FBS + 1%非必需氨基酸+2mM L -谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与培养基组分及接种密度相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱平衡2小时后观察贴壁
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:6(依实验需求调整接种密度)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞间隙扩大后终止
注意事项:避免消化过度导致细胞膜损伤,传代后6小时内避免移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 90%基础培养基)
细胞密度:冻存浓度:1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液,分装至冻存管;程序降温:4℃30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:存活率≥90%(台盼蓝染色法),融合后需通过跨膜电阻测定验证单层完整性
四、售后服务承诺
重发标准:1. 到货干冰完全融化且细胞存活率低于85%;2. 到货72小时内经检测证实微生物污染;3. 细胞STR鉴定与数据库标准株不匹配
不予重发情形:1. 未按规范使用胰酶浓度导致细胞脱落;2. 使用非指定培养基导致形态异常;3. 液氮保存不当造成冻存管破裂;4. 超代次使用(P10以上)引发的功能偏差