一、细胞基本属性
- 细胞名称：鸭胚胎成纤维细胞（Duck Embryo Fibroblasts）
- 细胞别称：DEF；鸭胚成纤维细胞；禽类胚胎成纤维细胞
- 种属来源：鸭（Anas platyrhynchos）
- 发育阶段：健康鸭胚胎（10 - 14日龄，无病原体感染）
- 组织来源：胚胎结缔组织（以真皮层及肌肉间质为主）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或明胶包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或星形，单层贴壁后呈放射状排列
- 细胞代数：原代至P5代（建议使用P2 - P4代以保证功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12基础培养基（含8% - 10% FBS+1%非必需氨基酸+1% L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖血清浓度及贴壁基质）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于疫苗生产或生物制品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁均匀且无过度堆积）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶），37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项：避免机械刮取（易损伤细胞膜完整性），原代细胞传代前需预铺明胶以提高贴壁效率
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液，程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证：复苏后48小时内检测贴壁率（应≥85%），功能验证：细胞迁移实验（划痕愈合率应符合禽类成纤维细胞特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常（需提供物流温度追踪报告）
- 72小时内证实细菌/真菌污染（需提供革兰氏染色或培养皿照片）
- 细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供明场显微图像）
- 物种鉴定与标识不符（需提供PCR检测结果）
- 不予重发情形：
- 未使用明胶或胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 使用低于5% FBS的培养基引发细胞生长停滞
- 未按规范进行胰酶消化（如延长消化时间致细胞损伤）
- 未在P5代前完成实验导致细胞特性改变
