外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(CBH)试剂盒-PNP法

一、产品简介

外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶（CBH）是参与纤维素

降解过程中的重要酶类。它能够特异性地作用于纤维素链的

末端，逐步切割产生纤维二糖等产物，在纤维素的生物转化

和降解过程中发挥着关键作用。

定义与功能：

定义：外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶（CBH）是一种

能够从纤维素链的非还原端或还原端进行切割，释放出纤维

二糖分子的酶。功能：在纤维素的降解过程中，CBH通过

逐步切割纤维素链，将复杂的纤维素大分子分解为较小的

纤维二糖片段，为后续的进一步水解提供底物，促进纤维素

向可利用糖类的转化。

催化机制：

CBH结合到纤维素链的末端，通过水解反应断裂糖苷键，

逐步释放出纤维二糖分子。其作用方式可能从纤维素链的

非还原端或还原端开始，沿着纤维素链进行切割。

活性测定方法：

本试剂盒采用微板法和PNP法进行外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/

纤维二糖水解酶（CBH）的活性测定。通过特定的反应体系，

使CBH作用于底物，生成可检测的产物，利用微板在特定

波长下检测产物的生成量，从而计算出CBH的酶活性大小。

重要性：

外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶（CBH）作为纤维素

降解过程中的关键酶，其活性和存在对于纤维素资源的有效

利用和生物转化具有重要意义。通过高效地切割纤维素链，

CBH为生物燃料生产、造纸工业、纺织工业等领域提供了

重要的技术支持，促进了相关产业的可持续发展。

二、所需的仪器和用品

进行外切 - β - 1,4 - 葡聚糖酶/纤维二糖水解酶（CBH）活性

测定实验时，需要以下仪器和用品：

酶标仪

用途：用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。酶标仪

具有高精度和高灵敏度的特点，能够准确测定样品在特定

波长下的吸光度值。注意事项：在使用前需要预热酶标仪，

并调节波长到合适数值。同时，要保持孔板洁净无异物遮盖，

以确保测量结果的准确性。

96 孔板（UV 板）

用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。UV 板

具有透明度高、光吸收性能好的特点，适合用于紫外光区的

测定。注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，

并且样品和试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取 CBH。低温

条件有助于保持 CBH 的活性，减少其在处理过程中的损失。

注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间等），

并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中，要密切

关注离心机有无异常声音等状况，若出现异常状况应立即

停止离心。

可调式移液器

用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够

根据不同的实验需求调整移液量，确保实验的准确性和

重复性。注意事项：在使用可调式移液器时，需要确保其

已进行校准，并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取

不同样品或试剂时，要及时更换移液器头，以防止交叉污染。

研钵

用途：用于研磨样品，使其达到实验所需的粒度。在 CBH 活性

测定实验中，研钵可能用于研磨含有纤维素的样品，以便

提取其中的 CBH。注意事项：在使用研钵时，要保持其干净

无污染，并确保研磨过程中样品不会受到污染。

冰

用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解或变性。

在 CBH 活性测定实验中，冰可能用于冷却样品或试剂，以

确保实验的准确性。注意事项：在使用冰时，要确保其干净

无污染，并及时更换以保持其低温效果。