一、产品简介
中性转化酶(NI),又名细胞质转化酶,是植物体内参与碳水化合物代谢的关键酶之一。它主要存在于细胞质中,在
植物的生长、发育以及应对环境胁迫等过程中发挥着重要作用。
定义与功能:
定义:中性转化酶是一类能够催化蔗糖水解为葡萄糖和
果糖的酶。
功能:在植物体内,中性转化酶通过催化蔗糖的水解,
调节细胞内蔗糖和己糖的比例,为植物的生长和代谢提供能量
与碳源。己糖是植物细胞进行呼吸作用和合成其他生物分子
的重要底物,能够维持植物细胞的正常生理功能。
催化机制:
中性转化酶催化蔗糖水解为葡萄糖和果糖,这一反应在
植物碳水化合物代谢中至关重要。酶与蔗糖分子结合,促进
糖苷键的断裂,从而生成葡萄糖和果糖。
活性测定方法:
本中性转化酶(NI)/细胞质转化酶试剂盒采用微板法进行
测定。该方法通过检测反应体系中葡萄糖或果糖的生成量来
计算中性转化酶的活性大小。生成的葡萄糖或果糖在特定波长
下有特征吸收峰,其生成量与中性转化酶的活性成正比。通过
测定反应体系中葡萄糖或果糖的生成量,可以间接计算出中性
转化酶的活性。
重要性:
中性转化酶在植物的生长发育和适应环境过程中具有重要
意义。它参与调节植物体内的碳水化合物代谢,对植物的根系
生长、果实发育以及抗逆性等方面都有影响。通过调节蔗糖的
水解,中性转化酶为植物提供了必要的能量和碳源,保障了植物
的正常生长和发育。
二、所需的仪器和用品
进行中性转化酶活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。酶标仪
具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长
下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的
数值。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的
准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板
具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且
样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取中性转化酶。
低温条件有助于保持中性转化酶的活性,减少其在处理过程中的
损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),
并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关注
离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据
不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,
并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,
要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在中性转化
酶活性测定实验中,研钵可能用于研磨植物组织等样品,以便
提取其中的中性转化酶。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨
过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。
在中性转化酶活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,
以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换
以保持其低温效果。