二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)试剂盒

一、产品简介

二磷酸核酮糖羧化酶（Rubisco）是植物光合作用卡尔文循环中催化

二氧化碳固定的关键酶。它广泛存在于植物的叶绿体中，在光合作用

的碳同化过程中起着至关重要的作用。

定义与功能：

定义：Rubisco是一种能够催化二磷酸核酮糖（RuBP）与二氧化碳

结合，生成两分子3 - 磷酸甘油酸（3 - PGA）的酶。

功能：在光合作用中，Rubisco通过催化RuBP与二氧化碳的羧化反应

，将无机碳转化为有机碳，是植物进行碳同化的起始步骤，为植物的

生长和发育提供物质基础。

催化机制：

Rubisco催化RuBP与二氧化碳结合，经过一系列反应生成两分子3 - 

PGA。在这个过程中，二氧化碳首先与RuBP结合，形成一个不稳定的

六碳中间产物，然后迅速分解为两分子3 - PGA。

活性测定方法：

本试剂盒采用微板法测定Rubisco的酶活性。通过检测反应体系中

特定产物的生成量或底物的消耗量，利用微板法在特定波长下进行

吸光度测定，根据吸光度的变化与酶活性的关系，间接计算出Rubisco

的酶活性大小。

重要性：

Rubisco作为光合作用碳同化的关键酶，其活性和存在对于植物的

光合作用效率、生长发育以及整个生态系统的碳循环具有重要意义。

它直接影响着植物对二氧化碳的固定能力，进而影响植物的产量和

品质。

二、所需的仪器和用品

进行Rubisco活性测定实验时，需要以下仪器和用品：

酶标仪

用途：用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。酶标仪具有

高精度和高灵敏度的特点，能够准确测定样品在特定波长下的吸光度

值。

注意事项：在使用前需要预热酶标仪，并调节波长到合适的值。

同时，要保持孔板洁净无异物遮盖，以确保测量结果的准确性。

96孔板（UV板）

用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。UV板具有

透明度高、光吸收性能好的特点，适合用于紫外光区的测定。

注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，并且样品

和试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取Rubisco。低温条件

有助于保持Rubisco的活性，减少其在处理过程中的损失。

注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间等），

并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中，要密切关注离心

机有无异常声音等状况，若出现异常状况应立即停止离心。

可调式移液器

用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同

的实验需求调整移液量，确保实验的准确性和重复性。

注意事项：在使用可调式移液器时，需要确保其已进行校准，并且

移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时，要及时

更换移液器头，以防止交叉污染。

研钵

用途：用于研磨样品，使其达到实验所需的粒度。在Rubisco活性

测定实验中，研钵可能用于研磨植物组织等样品，以便提取其中的

Rubisco。

注意事项：在使用研钵时，要保持其干净无污染，并确保研磨过程

中样品不会受到污染。

冰

用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解或变性。在

Rubisco活性测定实验中，冰可能用于冷却样品或试剂，以确保实验

的准确性。

注意事项：在使用冰时，要确保其干净无污染，并及时更换以保持

其低温效果。