叶绿体3-磷酸甘油醛脱氢酶(NADPH-GAPDH)试剂盒

一、产品简介

叶绿体 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADPH - GAPDH）是植物叶绿体中

参与光合作用卡尔文循环的关键酶，它在叶绿体的能量代谢和

碳水化合物合成过程中起着至关重要的作用。

定义与功能：

定义：叶绿体 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADPH - GAPDH）是一种能

够催化 1,3 - 二磷酸甘油酸还原为 3 - 磷酸甘油醛，同时将

NADPH 氧化为 NADP⁺的酶。

功能：在光合作用卡尔文循环中，NADPH - GAPDH 通过催化上述

反应，将光反应产生的 NADPH 和 ATP 中的化学能转化为

碳水化合物中的化学能，参与光合产物的合成，对植物的

生长和发育具有重要意义。

催化机制：

NADPH - GAPDH 催化 1,3 - 二磷酸甘油酸接受来自 NADPH 的

氢原子，被还原为 3 - 磷酸甘油醛，同时 NADPH 被氧化为

NADP⁺。这一反应是卡尔文循环中固定二氧化碳后进行碳

同化的关键步骤，为后续的碳水化合物合成提供了重要的

中间产物。

活性测定方法：

本试剂盒采用微板法进行叶绿体 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADPH -

GAPDH）的活性测定。通过检测反应体系中 NADPH 在特定

波长下吸光度的变化来计算酶的活性大小。NADPH 在特定

波长处有特征吸收峰，其吸光度的减少速率与 NADPH -

GAPDH 的酶活性成正比。通过测定反应体系中 NADPH 吸光

度的变化量，可以间接计算出 NADPH - GAPDH 的酶活性。

重要性：

叶绿体 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADPH - GAPDH）作为卡尔文

循环中的关键酶，其活性和存在对于植物的光合作用效率、

碳同化过程以及光合产物的合成具有重要意义。通过不断

催化 1,3 - 二磷酸甘油酸的还原反应，NADPH - GAPDH 为

植物提供了持续的碳同化动力，保障了植物的正常生长和

发育。

二、所需的仪器和用品

进行叶绿体 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADPH - GAPDH）活性测定

实验时，需要以下仪器和用品：

酶标仪

用途：用于测量 NADPH 在特定波长下的光吸收值。酶标仪

具有高精度和高灵敏度的特点，能够准确测定样品在特定

波长下的吸光度值。

注意事项：在使用前需要预热酶标仪，并调节波长到合适

数值。同时，要保持孔板洁净无异物遮盖，以确保测量结

果的准确性。

96 孔板（UV 板）

用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。

UV 板具有透明度高、光吸收性能好的特点，适合用于紫

外光区的测定。

注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，并

且样品和试剂的加入量要准确。

低温离心机

用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取叶绿体 3 -

磷酸甘油醛脱氢酶（NADPH - GAPDH）。低温条件有助于保

持酶的活性，减少其在处理过程中的损失。

注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间

等），并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中，

要密切关注离心机有无异常声音等状况，若出现异常状况

应立即停止离心。

可调式移液器

用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够

根据不同的实验需求调整移液量，确保实验的准确性和

重复性。

注意事项：在使用可调式移液器时，需要确保其已进行校

准，并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样

品或试剂时，要及时更换移液器头，以防止交叉污染。

研钵

用途：用于研磨样品，使其达到实验所需的粒度。在叶绿

体 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADPH - GAPDH）活性测定实验

中，研钵可能用于研磨植物叶片等样品，以便提取其中的

酶。

注意事项：在使用研钵时，要保持其干净无污染，并确保

研磨过程中样品不会受到污染。

冰

用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解或变

性。在叶绿体 3 - 磷酸甘油醛脱氢酶（NADPH - GAPDH）活

性测定实验中，冰可能用于冷却样品或试剂，以确保实验

的准确性。

注意事项：在使用冰时，要确保其干净无污染，并及时更

换以保持其低温效果。