一、产品简介
丙酮酸磷酸二激酶(PPDK),是一种在生物代谢过程中发挥重要作用的酶。它参与了生物体中能量代谢与物质转化过程。
定义与功能:
定义:PPDK 是一种能够催化丙酮酸、ATP 和磷酸生成磷酸烯醇式丙酮酸、
AMP 和焦磷酸的酶。功能:PPDK 在生物体的能量代谢和碳代谢中扮演关键角色,
它可以将丙酮酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,为后续的糖酵解逆过程或其他代谢途径
提供重要的中间产物,对维持生物体的正常代谢平衡起着至关重要的作用。
催化机制:
PPDK 催化丙酮酸、ATP 和磷酸反应,生成磷酸烯醇式丙酮酸、AMP 和焦磷酸。
在此过程中,ATP 提供能量和磷酸基团,促使丙酮酸发生磷酸化反应,生成磷酸烯醇式丙酮酸。
活性测定方法:
本产品采用微板法测定 PPDK 的活性大小。微板法具有高通量、操作简便等特点,
通过检测反应体系中特定物质的变化情况来间接计算 PPDK 的酶活性。
重要性:
PPDK 作为生物体代谢过程中的关键酶,其活性和存在对于生物体维持正常的生理功能、
能量代谢以及物质合成具有重要意义。它的正常运作保障了生物体的各项生命活动能够顺利进行。
二、所需的仪器和用品
进行 PPDK 活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应体系中特定物质在特定波长下的光吸收值。
酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节到合适的波长。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96 孔板(UV 板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。
UV 板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取 PPDK。
低温条件有助于保持 PPDK 的活性,减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。
在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。
可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。
在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。
在 PPDK 活性测定实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,以便提取其中的 PPDK。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。
在 PPDK 活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。