货号 | 规格 | 检测方法 | 目录价 |
XM-F-DX004 | 24样 | 分光法 | 426 |
XM-F-DX004 | 48样 | 分光法 | 745 |
XM-W-DX004 | 48样 | 微板法 | 821 |
XM-W-DX003 | 96样 | 微板法 | 1398 |
一、产品简介
谷氨酰胺合成酶(GS)是生物体内一类重要的酶,
它在细胞的氮代谢过程中发挥着关键作用。GS能够
催化氨和谷氨酸合成谷氨酰胺,这一反应对于细胞
内氮的储存和转运、氨基酸的合成以及维持细胞内
氮的平衡都具有重要意义。
定义与功能:
定义:GS是一种能够催化氨和谷氨酸合成谷氨酰胺
的酶。功能:在细胞的氮代谢中,GS通过催化氨和
谷氨酸的反应,将氨固定为谷氨酰胺,从而参与细
胞内氮的储存和转运。同时,谷氨酰胺还是合成其
他氨基酸、核苷酸等生物分子的重要前体,GS对于
维持细胞内这些生物分子的正常合成和代谢起着至
关重要的作用。
催化机制:
GS催化氨和谷氨酸在ATP的参与下合成谷氨酰胺,
这一反应需要消耗能量。在反应过程中,ATP提供
磷酸基团,使谷氨酸活化,然后氨与活化的谷氨酸
结合,最终生成谷氨酰胺。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行GS活性的测定。通过特定
的反应体系,使GS催化底物发生反应,然后在特定
波长下检测反应产物的生成量,从而计算出GS的酶
活性大小。反应产物在特定波长处有特征吸收峰,
其生成量与GS的酶活性成正比。通过测定反应体系
中反应产物的生成量,可以间接计算出GS的酶活性。
重要性:
GS作为细胞氮代谢中的关键酶,其活性和存在对于
维持细胞内氮的平衡、氨基酸的合成以及生物分子
的正常代谢具有重要意义。通过不断催化氨和谷氨
酸合成谷氨酰胺,GS为细胞提供了稳定的氮源,保
障了细胞的正常生长和发育。
二、所需的仪器和用品
进行GS活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。
酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测
定样品在特定波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长
到特定波长。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,
以确保测量结果的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量
测定。UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,
适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污
染,并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取GS。
低温条件有助于保持GS的活性,减少其在处理过程
中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、
时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。在离
心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,
若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器
能够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的
准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已
进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。在
移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以
防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在
GS活性测定实验中,研钵可能用于研磨组织等样品,
以便提取其中的GS。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并
确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解
或变性。在GS活性测定实验中,冰可能用于冷却样
品或试剂,以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及
时更换以保持其低温效果。