谷氨酰胺合成酶(GS)试剂盒

氮代谢系列

货号

规格

检测方法

目录价

XM-F-DX00424样分光法426
XM-F-DX00448样分光法745
XM-W-DX00448样微板法821
XM-W-DX00396样微板法1398


一、产品简介

谷氨酰胺合成酶(GS)是生物体内一类重要的酶,

它在细胞的氮代谢过程中发挥着关键作用。GS能够

催化氨和谷氨酸合成谷氨酰胺,这一反应对于细胞

内氮的储存和转运、氨基酸的合成以及维持细胞内

氮的平衡都具有重要意义。


定义与功能:

定义:GS是一种能够催化氨和谷氨酸合成谷氨酰胺

的酶。功能:在细胞的氮代谢中,GS通过催化氨和

谷氨酸的反应,将氨固定为谷氨酰胺,从而参与细

胞内氮的储存和转运。同时,谷氨酰胺还是合成其

他氨基酸、核苷酸等生物分子的重要前体,GS对于

维持细胞内这些生物分子的正常合成和代谢起着至

关重要的作用。


催化机制:

GS催化氨和谷氨酸在ATP的参与下合成谷氨酰胺,

这一反应需要消耗能量。在反应过程中,ATP提供

磷酸基团,使谷氨酸活化,然后氨与活化的谷氨酸

结合,最终生成谷氨酰胺。


活性测定方法:

本试剂盒采用微板法进行GS活性的测定。通过特定

的反应体系,使GS催化底物发生反应,然后在特定

波长下检测反应产物的生成量,从而计算出GS的酶

活性大小。反应产物在特定波长处有特征吸收峰,

其生成量与GS的酶活性成正比。通过测定反应体系

中反应产物的生成量,可以间接计算出GS的酶活性。


重要性:

GS作为细胞氮代谢中的关键酶,其活性和存在对于

维持细胞内氮的平衡、氨基酸的合成以及生物分子

的正常代谢具有重要意义。通过不断催化氨和谷氨

酸合成谷氨酰胺,GS为细胞提供了稳定的氮源,保

障了细胞的正常生长和发育。


二、所需的仪器和用品

进行GS活性测定实验时,需要以下仪器和用品:


酶标仪

用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。

酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测

定样品在特定波长下的吸光度值。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长

到特定波长。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,

以确保测量结果的准确性。


96孔板(UV板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量

测定。UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,

适合用于紫外光区的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污

染,并且样品和试剂的加入量要准确。


低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取GS。

低温条件有助于保持GS的活性,减少其在处理过程

中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、

时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。在离

心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,

若出现异常状况应立即停止离心。


可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器

能够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的

准确性和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已

进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。在

移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以

防止交叉污染。


研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在

GS活性测定实验中,研钵可能用于研磨组织等样品,

以便提取其中的GS。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并

确保研磨过程中样品不会受到污染。


用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解

或变性。在GS活性测定实验中,冰可能用于冷却样

品或试剂,以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及

时更换以保持其低温效果。