乙酰乳酸合成酶(ALS)活性试剂盒

氮代谢系列

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规格

检测方法

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XM-F-DX03624样分光法927
XM-W-DX03648样微板法1611


一、产品简介

乙酰乳酸合成酶(ALS)是一种在生物代谢过程中起着重要作用的酶。它参与了支链氨基酸(如缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸)生物合成途径的早期阶段,

对于维持生物体正常的生长、发育和代谢平衡具有重要意义。


定义与功能:

定义:乙酰乳酸合成酶(ALS)是一种能够催化丙酮酸或 2 - 丁酮酸缩合反应,

生成乙酰乳酸或乙酰羟基丁酸的酶。

功能:在生物体内,ALS 主要负责支链氨基酸合成途径中的关键步骤。

通过催化上述缩合反应,为后续支链氨基酸的合成提供前体物质,

对于细胞的蛋白质合成、能量代谢等过程至关重要。

同时,它也在植物的生长和发育过程中发挥重要作用,

如影响植物的株高、分蘖等生长性状。


催化机制:

ALS 催化丙酮酸或 2 - 丁酮酸发生缩合反应,丙酮酸分子之间或丙酮酸与 2 - 丁酮酸之间,

通过酶的催化作用形成乙酰乳酸或乙酰羟基丁酸。

在这个过程中,ALS 提供了合适的活性位点,降低了反应的活化能,

使反应能够在生理条件下顺利进行。


活性测定方法:

本试剂盒采用微板法来测定乙酰乳酸合成酶(ALS)的活性。

微板法具有高通量、操作简便等优点。

通过特定的反应体系和检测手段,在特定波长下检测反应产物的生成量,

根据产物生成量与 ALS 活性的关系,间接计算出 ALS 的酶活性大小。


重要性:

乙酰乳酸合成酶(ALS)作为支链氨基酸合成途径的关键酶,

其活性和存在对于生物体的正常生长、发育以及适应外界环境具有重要意义。

在农业领域,ALS 是许多除草剂的作用靶点,通过抑制 ALS 的活性来达到除草的目的。

了解 ALS 的活性变化有助于研究除草剂的作用机制和开发新型除草剂。

在生物研究中,ALS 活性的测定对于深入了解生物体的代谢调控网络具有重要价值。


二、所需的仪器和用品

进行乙酰乳酸合成酶(ALS)活性测定实验时,需要以下仪器和用品:


酶标仪

用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。

酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值,

从而根据吸光度与产物浓度的关系计算 ALS 的活性。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的检测波长。

同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。


96 孔板(UV 板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

UV 板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。


低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取 ALS。

低温条件有助于保持 ALS 的活性,减少其在处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。

在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。


可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。

可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。

在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。


研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。

在 ALS 活性测定实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,以便提取其中的 ALS。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。


用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。

在 ALS 活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。