一、产品简介
谷草转氨酶/天冬氨酸氨基转氨酶(GOT/AST)是一种参与人体氨基酸代谢的重要酶,在肝脏、心肌等组织中含量丰富。它在氨基转移过程中发挥关键作用,
对维持细胞内的氮代谢平衡具有重要意义。通过催化天冬氨酸和α - 酮戊二酸之间的氨基转移反应,
生成草酰乙酸和谷氨酸。该过程不仅参与了三羧酸循环的物质代谢,
还与能量的产生和利用密切相关。
定义与功能:
定义:GOT/AST是一种能够催化天冬氨酸和α - 酮戊二酸之间氨基转移反应,
生成草酰乙酸和谷氨酸的酶。
功能:GOT/AST在氨基酸代谢、三羧酸循环等生理过程中起着关键作用。
它能够促进氨基酸的转运和代谢,维持细胞内氮平衡,
同时也参与了能量的产生和利用。在肝脏和心肌等组织中,
GOT/AST的活性变化可以反映这些组织的功能状态和健康状况。
催化机制:
GOT/AST催化天冬氨酸的氨基转移到α - 酮戊二酸上,形成草酰乙酸和谷氨酸。
这一反应过程依赖于磷酸吡哆醛作为辅酶,它能够接受和传递氨基,
促进反应的进行。在反应中,天冬氨酸的氨基与磷酸吡哆醛结合,
然后转移到α - 酮戊二酸上,生成相应的产物。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行GOT/AST的活性测定。在特定的反应体系中,
GOT/AST催化底物反应,生成的产物可以通过特定的检测方法进行定量。
通过在特定波长下检测产物的生成量,可以间接计算出GOT/AST的酶活性。
微板法具有高通量、灵敏度高的特点,能够同时处理多个样品,
提高检测效率。
重要性:
GOT/AST在临床上是评估肝脏和心肌功能的重要指标。当肝脏或心肌受到损伤时,
细胞内的GOT/AST会释放到血液中,导致血液中GOT/AST的活性升高。
通过检测血液中GOT/AST的活性,可以早期发现肝脏和心肌的病变,
为疾病的诊断和治疗提供重要依据。此外,GOT/AST的活性变化还可以反映药物治疗的效果和病情的进展。
二、所需的仪器和用品
进行GOT/AST活性测定实验时,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应产物在特定波长下的光吸收值。酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,
能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的检测波长。
同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。
96孔板
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。96孔板具有规格统一、操作方便的特点,
适合用于批量样品的检测。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,去除杂质。低温条件有助于保持酶的活性,
减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已预冷至适当温度。
在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,
确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。
在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止酶失活。在GOT/AST活性测定实验中,
冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。