一、产品简介
NADPH - 谷氨酸脱氢酶（NADPH - GDH）存在于酵母菌中，是参与细胞内氮代谢和能量代谢的重要酶。它在酵母菌
的谷氨酸合成与分解过程中发挥关键作用，对于维持
细胞内氨基酸平衡和能量供应具有重要意义。
定义与功能：
定义：NADPH - GDH是一种能够催化α - 酮戊二酸、氨
和NADPH反应生成谷氨酸和NADP⁺的酶。
功能：在酵母菌的代谢过程中，NADPH - GDH通过催化
上述反应，参与细胞内氮的同化和氨基酸的合成。
同时，该反应过程中NADPH的氧化为细胞提供能量，
有助于细胞的生长和繁殖。此外，NADPH - GDH还能
调节细胞内谷氨酸的水平，维持细胞内环境的稳定。
催化机制：
NADPH - GDH催化α - 酮戊二酸、氨和NADPH反应生成
谷氨酸和NADP⁺。在这个反应中，NADPH作为辅酶
提供还原力，将氨加到α - 酮戊二酸上，形成谷氨酸，
同时NADPH被氧化为NADP⁺。
活性测定方法：
本试剂盒采用微板法测定NADPH - GDH的酶活性大小。
通过检测在特定条件下反应体系中NADPH的氧化速率
（通常在340nm波长处检测吸光度的变化），由于
NADPH在340nm处有特征吸收峰，其氧化速率与
NADPH - GDH的酶活性成正比，从而间接计算出
NADPH - GDH的酶活性。
重要性：
NADPH - GDH在酵母菌的氮代谢和能量代谢中起着核心
作用，其活性和存在对于酵母菌的正常生长、繁殖
以及适应环境变化具有至关重要的意义。通过不断
催化α - 酮戊二酸、氨和NADPH的反应，NADPH - GDH
为酵母菌提供了必要的氨基酸和能量，保障了酵母菌
的正常生理功能。
二、所需的仪器和用品
进行NADPH - GDH活性测定实验时，需要以下仪器和用品：
酶标仪
用途：用于测量NADPH在340nm处的光吸收值。酶标仪
具有高精度和高灵敏度的特点，能够准确测定样品
在特定波长下的吸光度值。
注意事项：在使用前需要预热酶标仪，并调节波长到
340nm。同时，要保持孔板洁净无异物遮盖，以确保
测量结果的准确性。
96孔板（UV板）
用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。
UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点，适合用于
紫外光区的测定。
注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，
并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取
NADPH - GDH。低温条件有助于保持NADPH - GDH的活性，
减少其在处理过程中的损失。
注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、
时间等），并确保离心机已预冷至适当温度。在离心
过程中，要密切关注离心机有无异常声音等状况，
若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器
能够根据不同的实验需求调整移液量，确保实验的
准确性和重复性。
注意事项：在使用可调式移液器时，需要确保其已进行
校准，并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取
不同样品或试剂时，要及时更换移液器头，以防止
交叉污染。
研钵
用途：用于研磨样品，使其达到实验所需的粒度。在
NADPH - GDH活性测定实验中，研钵可能用于研磨酵母菌
细胞等样品，以便提取其中的NADPH - GDH。
注意事项：在使用研钵时，要保持其干净无污染，并
确保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解
或变性。在NADPH - GDH活性测定实验中，冰可能用于
冷却样品或试剂，以确保实验的准确性。
注意事项：在使用冰时，要确保其干净无污染，并及时
更换以保持其低温效果。
