肉桂醇脱氢酶(CAD)试剂盒

一、产品简介

肉桂醇脱氢酶（CAD，EC 1.1.1.195）在植物次生代谢特别是木质素合成中扮演着关键角色，与植物的生长发育和抵御病原菌入侵紧密相关。

1. 定义与功能：

• 定义：CAD是一种氧化还原酶，能够以NADP+为受体，作用于供体CH-OH基团上，催化特定的氧化还原反应。

• 功能：CAD在木质素生物合成途径中起着关键作用，催化肉桂醇生成肉桂醛，这是木质素单体合成反应中的最后一步。木质素是植物细胞壁的主要成分之一，对植物的生长发育、机械支撑以及抵御病原菌入侵等方面具有重要影响。

2. 催化机制：

• CAD通过其独特的活性位点识别并降解肉桂醇，生成肉桂醛和NADPH。

• 在这一反应过程中，NADPH作为还原剂参与反应，而肉桂醛则是木质素合成的重要前体物质。

3. 活性测定方法：

• 本试剂盒提供了一种简单、灵敏、快速的测定方法，用于检测CAD的活性。

• 该方法基于CAD催化肉桂醇和NADP+生成肉桂醛和NADPH的反应。生成的NADPH与特异显色剂反应，产生有色物质。

• 通过检测有色物质的增加速率，可以计算出CAD的活性大小。这一方法具有操作简便、结果准确等优点，适用于实验室中CAD活性的常规测定。

4. 生理意义与应用：

• CAD的活性与植物的生长发育和抗逆性密切相关。在逆境条件下，植物体内CAD的活性往往会发生变化，从而影响木质素的合成和植物的抗逆性。

• 通过测定CAD的活性，可以了解植物体内木质素的合成情况，为植物遗传改良、分子育种以及植物抗性研究提供重要依据。此外，CAD的研究还有助于深入理解植物次生代谢途径的调控机制。

二、所需的仪器和用品

进行CAD活性测定实验时，需要以下仪器和用品：

1. 酶标仪

• 用途：用于测定有色物质在特定波长下的吸光值。在本实验中，酶标仪通常设置为340nm波长（也有说法为450nm），以检测NADPH与特异显色剂反应产生的有色物质的吸光度。

• 注意事项：在使用前需要预热酶标仪，并调节波长到设定值。同时，要保持孔板洁净无异物遮盖，以确保测量结果的准确性。

2. 96孔板

• 用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。96孔板具有多个小孔，可以同时处理多个样品，提高实验效率。

• 注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，并且样品和试剂的加入量要准确。

3. 台式离心机

• 用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取CAD或去除杂质。台式离心机具有操作简便、转速可调等特点，适用于实验室中的常规离心操作。

• 注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间等），并确保离心机已平衡。在离心过程中，要密切关注离心机有无异常声音等状况。

4. 可调式移液器

• 用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量，确保实验的准确性和重复性。

• 注意事项：在使用移液器时，需要确保其已进行校准，并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时，要及时更换移液器头，以防止交叉污染。

5. 研钵

• 用途：用于研磨植物组织或细胞等样品，以便提取其中的CAD。研钵具有操作简便、研磨效果好等特点，适用于实验室中的样品前处理。

• 注意事项：在使用研钵时，要保持其干净无污染，并确保研磨过程中样品不会受到污染。

6. 冰

• 用途：用于保持样品在低温条件下，防止其发生降解或变性。在CAD活性测定实验中，冰可能用于冷却样品或试剂，以确保实验的准确性。

• 注意事项：在使用冰时，要确保其干净无污染，并及时更换以保持其低温效果。

7. 蒸馏水

• 用途：用于配制试剂、稀释样品或清洗仪器等。蒸馏水具有纯净度高、无杂质等特点，是实验中常用的溶剂。

• 注意事项：在使用蒸馏水时，要确保其质量符合实验要求，并避免受到污染。

XM-W-BBW002-48T 肉桂醇脱氢酶（CAD）试剂盒说明书-微板法-48样.docx

XM-F-BBW002 肉桂醇脱氢酶（CAD）试剂盒说明书-分光法-48样.docx

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