货号 | 规格 | 检测方法 | 目录价 |
| XM-E-M0170-48T | 48T | 夹心法 | 1800 |
| XM-E-M0170-96T | 96T | 夹心法 | 2300 |
| XM-E-M0170-48T（高） | 48T | 夹心法 | 2200 |
| XM-E-M0170-96T（高） | 96T | 夹心法 | 2950 |
一、产品基本属性
产品名称：小鼠组织蛋白酶S (CTSS) ELISA科研试剂盒（夹心法）
规格：48T/96T
检测原理：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专门设计用于体外定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆或其他相关生物样本中的CTSS水平。实验过程中，酶标板预包被有特异性抗CTSS抗体，与样本中的CTSS结合形成抗原-抗体复合物。经过洗涤去除未结合成分后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，与抗原-抗体复合物结合。加入显色底物，在辣根过氧化物酶的作用下发生颜色反应，颜色深浅与CTSS的浓度成正比。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中CTSS的浓度。
用途：适用于科研及临床前研究，用于研究CTSS在小鼠疾病发病机制中的作用，评估治疗效果，以及探索新药靶点等。
反应类型：夹心法
反应时间：约4-5小时
反应性：高度特异，针对小鼠CTSS
检测方法：比色法
灵敏度：能够检测到低于试剂盒提供的最低浓度标准品的CTSS
样本体积：100μL
样本类型：血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆或其他相关生物样本
特异性：与其他相关蛋白无明显交叉反应
重复性：板内及板间变异系数均小于10%
二、样品处理与活化方法
血清和血浆样本处理：
采集血液后，尽快将血液置于无菌试管中，并按照标准程序进行离心以分离血清或血浆。
离心后，小心收集上清液（血清或血浆），并避免吸入任何细胞成分或沉淀。
将收集到的血清或血浆样本分装至干净的离心管中，并标记清楚。
若需长期保存，应将样本置于-20℃或更低温度下冷冻保存。避免反复冻融。
细胞培养上清液处理：
收集细胞培养上清液时，应确保细胞培养物处于对数生长期，且未受到任何异常刺激。
轻轻摇晃培养瓶或培养板，以充分混匀培养上清液。
使用无菌吸管或移液器小心吸取上清液，并避免吸入任何细胞或碎片。
将收集到的上清液分装至干净的离心管中，并标记清楚。
若需长期保存，同样应将样本置于-20℃或更低温度下冷冻保存。
组织匀浆处理：
取适量新鲜或冷冻的组织样本，使用无菌手术器械将组织切割成小块。
将组织块置于匀浆器中，加入适量生理盐水或缓冲液进行匀浆。
匀浆过程中应保持冰浴，以避免蛋白酶的降解作用。
匀浆完成后，将匀浆液离心以去除不溶性物质。
收集上清液，并分装至干净的离心管中，标记清楚。
若需长期保存，应将样本置于-20℃或更低温度下冷冻保存。
样本活化（如适用）：
对于某些特定类型的样本（如冻存的血清、血浆或组织匀浆），在检测前可能需要进行活化处理。
活化方法通常涉及将样本在适宜的温度下（如37℃）温育一段时间，以恢复其活性。
具体活化条件应根据样本类型和试剂盒说明书中的建议进行确定。
三、精密度与回收率
精密度：通过低、中、高浓度样本的批内及批间变异系数评估，均小于10%，确保结果的稳定性和可靠性。
回收率：在血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等样本中添加已知浓度的THBS2标准品，回收率范围及平均回收率如下表所示（实际表格数据未列出，因不添加具体数据），且在不同稀释度下表现出良好的线性回收特性。
四、试剂盒组成及保存
48孔配置：说明书1份、封板膜2片、密封袋1个、酶标包被板1×48、标准品0.3ml×6管、酶标试剂5ml×1瓶、样品稀释液6ml×1瓶、显色剂A液6ml×1瓶、显色剂B液6ml×1瓶、终止液3ml×1瓶、20×浓缩洗涤液30ml×1瓶。
96孔配置：同上，但各组分数量加倍。
保存条件：按说明书指示保存于2-8℃，避免反复冻融和直接光照。
五、注意事项
使用前请确保所有试剂恢复至室温并充分混匀。
严格按照操作步骤进行实验，避免交叉污染。
试剂瓶盖需紧密封闭，以防蒸发和污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准，分装时可能略有盈余。
六、操作步骤
准备：将所需试剂和样本恢复至室温，并准备好实验所需的设备和耗材。
标准品加样：在标准品孔中加入不同浓度的标准品溶液。
样本加样：在样本孔中加入待测样本溶液。
加酶：向所有孔中加入适量的酶标试剂。
温育：用封板膜封住酶标板，置于37℃恒温箱中温育。
洗涤：轻轻揭去封板膜，弃去孔内液体，用洗涤液洗涤5次，拍干。
显色：向每孔中加入显色剂A和B，避光显色。
终止：显色结束后，向每孔中加入终止液终止反应。
测定：在450nm波长下测定各孔的OD值。
七、试验所需自备物品
酶标仪（450nm波长滤光片）
高精度移液器及吸头
37℃恒温箱
双蒸水或去离子水
吸水纸
离心机（用于处理细胞培养上清和组织匀浆）
八、结果判断与分析
根据OD值绘制标准曲线，确保曲线的R²值大于0.99。
通过样本的OD值在标准曲线上查找对应的THBS2浓度。
根据实验需求对数据进行统计分析，如计算均值、标准差、t检验或方差分析等。
