一、产品简介
脂肪酸合成酶(FAS)是一种在生物体脂质代谢过程中发挥关键作用的酶。它主要负责催化乙酰辅酶 A 和丙二
酸单酰辅酶 A 合成脂肪酸,在细胞能量储存、细胞膜组
成以及信号传导等生理过程中具有重要意义。
定义与功能:
定义:脂肪酸合成酶(FAS)是一种多功能酶复合物,
能够将乙酰辅酶 A 和丙二酸单酰辅酶 A 逐步缩合,经过
一系列反应合成饱和脂肪酸。
功能:FAS 在体内的主要功能是合成脂肪酸,为细胞
提供能量储存物质和生物膜的组成成分。
通过调节脂肪酸的合成,FAS 参与维持细胞内脂质稳态,
对细胞的生长、增殖和分化起到重要的调控作用。
催化机制:
FAS 催化乙酰辅酶 A 和丙二酸单酰辅酶 A 进行缩合反应,
以 NADPH 作为辅酶提供还原力,逐步延长脂肪酸链。
在这个过程中,FAS 上的多个活性中心协同作用,完成
乙酰基的转移、丙二酸单酰基的缩合、还原等一系列反应,
最终生成特定长度的脂肪酸。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行脂肪酸合成酶(FAS)活性的
测定。该方法通过检测反应体系中特定产物的生成量或
底物的消耗量,来间接反映 FAS 的酶活性大小。
在特定的反应条件下,FAS 催化底物反应,生成的产物
在特定波长下有特征吸收峰,通过酶标仪检测该波长下
的吸光度变化,从而计算出 FAS 的酶活性。
重要性:
脂肪酸合成酶(FAS)在生物体的脂质代谢中处于核心
地位,其活性的高低直接影响到细胞内脂肪酸的合成水平。
在生理状态下,FAS 对于维持细胞和组织的正常功能至
关重要。在病理状态下,FAS 的异常表达与肥胖、糖尿
病、心血管疾病以及某些癌症的发生发展密切相关。
因此,对 FAS 活性的准确测定对于研究这些疾病的发病
机制和药物研发具有重要意义。
二、所需的仪器和用品
进行脂肪酸合成酶(FAS)活性测定实验时,需要以下
仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量特定波长下反应产物的光吸收值。酶标
仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在
特定波长下的吸光度值,从而计算出 FAS 的酶活性。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到指
定值。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量
结果的准确性。
96 孔板(UV 板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。
UV 板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于
紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,
并且样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取 FAS。
低温条件有助于保持 FAS 的活性,减少其在处理过程中
的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时
间等),并确保离心机已预冷至适当温度。
在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况,
若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能
够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性
和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行
校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。
在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防
止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在 FAS
活性测定实验中,研钵可能用于研磨组织等样品,以便
提取其中的 FAS。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确
保研磨过程中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或
变性。在 FAS 活性测定实验中,冰可能用于冷却样品
或试剂,以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时
更换以保持其低温效果。