乙酰辅酶A羧化酶(ACC)试剂盒(定磷法)

脂肪酸系列

货号

规格

检测方法

目录价

XM-F-ZFS02424样分光法1292
XM-W-ZFS02448样微板法2402


一、产品简介

乙酰辅酶A羧化酶(ACC)是生物体内脂肪酸合成的关键酶,它在调节脂肪酸的生物合成和代谢平衡中起着至关重要的作用。

它广泛存在于各种生物细胞内,参与细胞内脂质代谢的重要过程。


定义与功能:

定义:乙酰辅酶A羧化酶(ACC)是一种能够催化乙酰辅酶A

羧化生成丙二酸单酰辅酶A的酶。

功能:在脂肪酸合成过程中,ACC通过催化乙酰辅酶A羧化

生成丙二酸单酰辅酶A,为脂肪酸合成提供关键的底物,

从而调控细胞内脂肪酸的合成速率和含量。丙二酸单酰辅酶A

在脂肪酸合成过程中作为碳链延伸的二碳单位供体,

参与脂肪酸链的逐步延长。

催化机制:

ACC催化乙酰辅酶A在生物素的参与下,利用ATP提供的能量,

将二氧化碳固定到乙酰辅酶A上,生成丙二酸单酰辅酶A。

这一反应是脂肪酸合成的限速步骤,对整个脂肪酸合成途径

的调控具有重要意义。

活性测定方法:

本试剂盒采用微板法定磷法来测定乙酰辅酶A羧化酶(ACC)

的活性。通过检测反应体系中磷酸根的生成量,

间接反映ACC的酶活性大小。在特定的反应条件下,

ACC催化反应生成的产物会与检测试剂发生显色反应,

其吸光度的变化与磷酸根的生成量成正比,进而与ACC的

酶活性成正比。通过酶标仪测定特定波长下的吸光度值,

即可计算出ACC的酶活性。

重要性:

ACC作为脂肪酸合成的关键酶,其活性和存在对于维持细胞内

脂质代谢的平衡、调节能量储存和利用具有重要意义。

通过调控ACC的活性,可以影响细胞内脂肪酸的合成和代谢,

进而对生物体的生理功能和健康状况产生重要影响。

在医学和生物学研究中,ACC也是一个重要的药物靶点,

用于开发治疗肥胖、糖尿病等代谢性疾病的药物。


二、所需的仪器和用品

进行乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性测定实验时,需要以下

仪器和用品:


酶标仪

用途:用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。

酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定

样品在特定波长下的吸光度值,以计算ACC的酶活性。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适

的检测波长。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,

以确保测量结果的准确性。


96孔板(UV板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。

UV板具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于

吸光度的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,

并且样品和试剂的加入量要准确。


低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取ACC。

低温条件有助于保持ACC的活性,减少其在处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),

并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,

要密切关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况

应立即停止离心。


可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够

根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和

重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,

并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或

试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。


研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在ACC

活性测定实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,

以便提取其中的ACC。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保

研磨过程中样品不会受到污染。


用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。

在ACC活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,

以确保实验的准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换

以保持其低温效果。