磷脂酶C(PLC)试剂盒

脂肪酸系列

货号

规格

检测方法

目录价

XM-F-ZFS01624样分光法1596
XM-W-ZFS01648样微板法2432


一、产品简介

磷脂酶C(PLC)是生物体内一类重要的酶,在细胞内的信号转导过程中发挥着关键作用。它能够特异性地催化磷脂酰肌醇 - 4,5 - 二

磷酸(PIP₂)水解,生成肌醇 - 1,4,5 - 三磷酸(IP₃)和二酰甘油

(DAG)这两种重要的第二信使,从而参与调节细胞的多种生理活动,

如细胞增殖、分化、凋亡以及代谢调控等。


定义与功能:

定义:磷脂酶C(PLC)是一种能够催化磷脂酰肌醇 - 4,5 - 二磷酸

(PIP₂)水解为肌醇 - 1,4,5 - 三磷酸(IP₃)和二酰甘油(DAG)的酶。

功能:在细胞信号转导通路中,PLC通过催化PIP₂水解产生IP₃和DAG,

IP₃可以促使内质网释放Ca²⁺,升高细胞内Ca²⁺浓度,而DAG则可以

激活蛋白激酶C(PKC),进而引发一系列的细胞生物学效应,调节

细胞的生长、发育和功能。


催化机制:

PLC催化PIP₂分子中的磷酸二酯键断裂,将其水解为IP₃和DAG。这

一反应是细胞内信号转导网络中的关键步骤,使得细胞外的信号

能够通过膜上的受体传递到细胞内,引起细胞内的生理响应。


活性测定方法:

本试剂盒采用微板法进行磷脂酶C(PLC)的活性测定。通过特定

的底物和检测试剂,在适宜的条件下与样品中的PLC反应,利用酶

标仪检测反应体系中特定产物的生成量或吸光度变化,从而间接

反映PLC的酶活性大小。


重要性:

磷脂酶C(PLC)作为细胞信号转导通路中的关键酶,其活性和功能

对于维持细胞的正常生理功能、调控细胞的生长和发育以及应对

外界刺激具有至关重要的意义。准确测定PLC的活性有助于深入研

究细胞信号转导机制,为相关疾病的诊断、治疗以及药物研发提

供重要的理论依据和实验支持。


二、所需的仪器和用品

进行磷脂酶C(PLC)活性测定实验时,需要以下仪器和用品:


酶标仪

用途:用于测量反应体系中特定产物的吸光度值。酶标仪具有高

精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光

度值,从而计算出PLC的酶活性。

注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节到合适的检测波长。

同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。


96孔板(UV板)

用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板具

有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于微板法的测定。

注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品

和试剂的加入量要准确。


低温离心机

用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取PLC。低温条件

有助于保持PLC的活性,减少其在处理过程中的损失。

注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),

并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切关注离

心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。


可调式移液器

用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不

同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。

注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并

且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要

及时更换移液器头,以防止交叉污染。


研钵

用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在PLC活性测定

实验中,研钵可能用于研磨生物组织等样品,以便提取其中的PLC。

注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过

程中样品不会受到污染。


用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在

PLC活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的

准确性。

注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保

持其低温效果。