干细胞成脂诱导分化试剂盒(培养体系)

诱导分化培养基

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XM-X0717200mL(A+B)诱导分化培养基2563


一、细胞基本属性

- 细胞名称:人骨髓间充质干细胞(Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells)

- 细胞别称:hBM - MSC;间充质干细胞;成脂诱导干细胞

- 种属来源:人(Homo sapiens)

- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体经严格筛选无遗传性疾病史)

- 组织来源:骨髓穿刺样本(无菌条件下分离纯化)

- 生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被的培养基底)

- 细胞形态:长梭形或纺锤状,成脂诱导后可见脂滴累积

- 细胞代数:P3 - P6(确保多向分化潜能及基因组稳定性)

- 细胞规格:5×10⁵ cells/T75培养瓶或2mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:成脂诱导分化专用培养基(含地塞米松、胰岛素、吲哚美辛等诱导因子)

- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

- 倍增时间:~72 - 96小时(分化阶段增殖速率减缓)

- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内移植


二、细胞培养操作指南

- 收货处理

  - 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热的成脂诱导培养基

  - 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于CO₂培养箱静置4小时

- 传代标准:细胞融合度达70% - 80%(避免过度融合影响分化效率)

- 传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)

- 消化方法

  - 使用:0.25% Trypsin - EDTA(含钙离子螯合剂)

  - 操作:37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落

- 注意事项

  - 诱导阶段需严格更换为成脂分化培养基(基础培养基无法触发分化)

  - 分化过程中每3天更换培养基,持续14 - 21天至脂滴明显形成


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)

- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL

- 冻存步骤

  - 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液

  - 程序降温:4℃30分钟→ - 80℃24小时→转入液氮长期保存

- 复苏验证

  - 复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)

  - 分化能力验证:油红O染色检测脂滴形成(P4代细胞应具备成脂分化潜能)


四、售后服务承诺

- 重发标准

  - 运输过程中温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录证明)

  - 7天内经检测证实支原体污染(需提供第三方检测报告)

  - 细胞复苏后贴壁率低于80%(需提供培养24小时显微图像)

  - 成脂分化效率未达说明书标准(需提供油红O染色结果)

- 不予重发情形

  - 未按说明书使用基础培养基替代成脂诱导培养基

  - 诱导过程中频繁中断培养(如频繁开盖或温度波动)

  - 使用非配套包被材料导致细胞贴壁失败

  - 超过建议代数(P6)仍要求保证分化效率


(注:本产品需配合专用成脂诱导分化培养基及配套包被试剂使用,操作人员需具备干细胞培养经验。)