一、细胞基本属性
试剂盒名称为干细胞成软骨诱导分化试剂盒（含基础培养基与诱导添加剂）。主要成分是基础培养基（高糖DMEM/F12）+成软骨诱导添加剂（含TGF - β3、BMP - 2、抗坏血酸及地塞米松）。适用细胞类型是人间充质干细胞（hMSCs），种属来源为人。细胞状态要求为未分化hMSCs（需通过CD73/CD90/CD105阳性率≥95%验证）。诱导周期为21 - 28天（阶段性更换诱导培养基）。诱导条件为气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%。形态变化为诱导7天后细胞聚集成结节样结构，14天后基质分泌增加。检测指标有阿辛蓝染色（酸性多糖）、Ⅱ型胶原免疫荧光染色、Sox9基因表达量。保存条件是基础培养基4℃避光保存；诱导添加剂 - 20℃分装冻存（避免反复冻融）。应用范围仅限体外研究，不可用于临床治疗或体内实验。
二、细胞培养操作指南
细胞接种密度为初始接种密度：2×10⁴ cells/cm²（建议6孔板或15mL离心管微团培养）。培养基更换频率为每3天全量更换新鲜诱导培养基（避免细胞代谢废物累积）。诱导阶段调控方面，阶段一（0 - 7天）：激活TGF - β/Smad通路促进软骨祖细胞形成；阶段二（8 - 21天）：强化细胞外基质合成与软骨特异性标记物表达。关键注意事项为避免使用含血清培养基（血清成分可能抑制分化进程）；诱导全程需配合缺氧培养条件（氧浓度维持在5%以下更佳）。
三、细胞冻存操作规范
分化后细胞冻存的冻存液为含10% DMSO的软骨保护冻存液（含透明质酸基质），冻存密度为5×10⁵ cells/mL（保留细胞 - 基质复合结构）。梯度降温程序为4℃平衡30分钟 → - 80℃过夜 → 长期储存于液氮气相层。复苏后验证要求存活率≥85%（台盼蓝染色法）；基质完整性检测（胶原纤维网络经HE染色呈典型软骨陷窝结构）。
四、售后服务承诺
质量保障条款包括：1. 试剂盒组分经无菌及内毒素检测（符合ISO 10993标准）；2. 提供诱导分化效率验证数据（阳性对照组阿辛蓝染色OD值≥0.8）。重发标准为：1. 运输过程中冷链中断（需提供温度记录仪数据）；2. 试剂盒组分出现可见浑浊或沉淀（自收货日起7天内反馈）；3. 诱导分化效率低于承诺值的70%（需提供对照实验原始数据）。免责声明包括：1. 使用非配套培养基导致的诱导失败；2. 细胞传代次数超过P10导致的成软骨潜能下降；3. 未按阶段更换培养基或错误使用血清添加剂。
